AC16 Kardiyomiyosit Hücre Hattı

SV40-transformasyonu ile kaynaşmış insan ventrikül hücrelerinden türetilen AC16 hücre hattı, GATA4, MYCD, NFATc4 gibi transkripsiyon faktörlerinin ve alfa ve beta-miyozin ağır zinciri gibi kasılma proteinlerinin ekspresyonu dahil olmak üzere kardiyomiyositlerin tipik özelliklerini sergiler. AC16 hücreleri aynı zamanda boşluk bağlantı proteinleri connexin-43 ve connexin-40'ı da ifade eder ve fonksiyonel boşluk bağlantıları boya bağlama çalışmalarıyla doğrulanarak kardiyomiyosit araştırmalarındaki faydalarının altını çizer. SV40 onkogeni susturulduğunda AC16, kardiyak farklılaşma ve gelişimsel düzenlemenin göstergesi olan BMP2 ekspresyonu ile işaretlenen daha farklılaşmış bir duruma geçer.

Genel olarak, bilim insanları kalple ilgili durumlara yönelik bilgi ve potansiyel tedavileri ilerletmek için kök hücre farklılaşması, hayvan modelleri, moleküler analiz ve biyobelirteç keşfi dahil olmak üzere çeşitli teknikler kullanmaktadır. Timidin kinaz indüksiyonu ile birlikte mitojen ve yaşlanma yollarının katılımı, insan kardiyomiyositlerinin karmaşık doğasını ve patolojik koşullara verdikleri yanıtı daha da aydınlatmaktadır.

AC16 insan kardiyomiyosit hücre hattının olgun kardiyomiyositlerin davranışını taklit etme yeteneği, onu kardiyak araştırmalar için değerli bir model haline getirmektedir. Birincil kardiyomiyositlerin genetik yapısına yakından benzemektedir ve kardiyak gelişim, patoloji ve in vitro histon kaybının etkileri üzerine çalışmalara izin vermektedir, ancak kardiyomiyosit davranışı ve genetik karmaşıklığı birincil veya kök hücreden türetilmiş kardiyomiyositlerinkiyle tam olarak eşleşmeyebilir. Toksikoloji ve kardiyovasküler hastalık araştırmaları bağlamında, AC16 hücreleri kardiyomiyosit gelişimi, enflamasyon, yaralanma, rejenerasyon ve toksikolojik etkilerin anlaşılması için hayati bir araç olarak hizmet etmektedir.

AC16 insan kardiyomiyosit hücre hattının, gelişimsel ipuçlarına verdiği yanıt ve insan kardiyomiyositlerinin fizyolojik koşullarını simüle etme yeteneği de dahil olmak üzere benzersiz özellikleri, onu kalp hastalıklarının gizemlerini çözme ve yeni terapötik müdahaleler tasarlama arayışında vazgeçilmez bir varlık haline getirmektedir.

Kültür ortamı:DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukoz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodyum piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a). Kültür ortamını %12,5 FBS ile destekleyin ve nihai 2,5 mM L-Glutamin konsantrasyonu elde etmek için 0,9 mM L-Glutamin ekleyin
Farklılaşma ortamı: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukoz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodyum piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a). Tam farklılaştırma ortamını hazırlamak için 1x ITS+ (Gibco, katalog numarası 41400045) ve %2 At Serumu (Gibco, katalog numarası 16050130) ekleyin.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın