AC16 Cardiomyocyte Cell Line

La línea celular AC16, derivada de células ventriculares humanas fusionadas con células transformadas por el virus SV40, presenta características típicas de los cardiomiocitos, entre ellas la expresión de factores de transcripción como GATA4, MYCD y NFATc4, y de proteínas contráctiles como las cadenas pesadas de la alfa- y la beta-miosina. Las células AC16 también expresan las proteínas de las uniones comunicantes conexina-43 y conexina-40, y la funcionalidad de estas uniones ha sido confirmada mediante estudios de acoplamiento de colorantes, lo que resalta su utilidad en la investigación de los cardiomiocitos. Cuando se silencia el oncogén SV40, las células AC16 pasan a un estado más diferenciado, caracterizado por la expresión de BMP2, lo cual indica diferenciación cardíaca y regulación del desarrollo.

En general, los científicos emplean diversas técnicas, entre ellas la diferenciación de células madre, modelos animales, análisis moleculares y el descubrimiento de biomarcadores, para avanzar en el conocimiento y las posibles terapias para las afecciones relacionadas con el corazón. La participación de las vías de los mitógenos y la senescencia, junto con la inducción de la timidina quinasa, aclara aún más la naturaleza compleja de los cardiomiocitos humanos y su respuesta a las condiciones patológicas.

La capacidad de la línea celular de cardiomiocitos humanos AC16 para imitar el comportamiento de los cardiomiocitos maduros la convierte en un modelo valioso para la investigación cardíaca. Se asemeja mucho a la composición genética de los cardiomiocitos primarios, lo que permite realizar estudios sobre el desarrollo cardíaco, la patología y las implicaciones de la pérdida de histonas in vitro; sin embargo, es posible que el comportamiento de los cardiomiocitos y su complejidad genética no coincidan plenamente con los de los cardiomiocitos primarios o derivados de células madre. En el contexto de la investigación en toxicología y enfermedades cardiovasculares, las células AC16 sirven como una herramienta vital para comprender el desarrollo, la inflamación, la lesión, la regeneración y los efectos toxicológicos de los cardiomiocitos.

Las propiedades únicas de la línea celular de cardiomiocitos humanos AC16, incluida su respuesta a las señales de desarrollo y la capacidad de simular las condiciones fisiológicas de los cardiomiocitos humanos, la convierten en un recurso indispensable en la búsqueda para desentrañar los misterios de las enfermedades cardíacas y diseñar nuevas intervenciones terapéuticas.

Medio de cultivo: DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p/v: 0,5 mM de piruvato de sodio, p/v: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a). Suplementa el medio de cultivo con un 12,5 % de FBS y agrega 0,9 mM de L-glutamina para alcanzar una concentración final de 2,5 mM de L-glutamina.
Medio de diferenciación: DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p/v: 0,5 mM de piruvato de sodio, p/v: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a). Para preparar el medio de diferenciación completo, agrega 1x ITS+ (Gibco, número de catálogo 41400045) y 2 % de suero de caballo (Gibco, número de catálogo 16050130).

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.