AC16 Cardiomyocyte Cell Line

เซลล์ไลน์ AC16 ซึ่งได้มาจากเซลล์หัวใจห้องล่างของมนุษย์ที่รวมกับเซลล์ที่เปลี่ยนแปลงด้วย SV40 แสดงลักษณะเฉพาะของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ รวมถึงการแสดงออกของปัจจัยการถอดรหัส เช่น GATA4, MYCD, NFATc4 และโปรตีนที่เกี่ยวกับการหดตัว เช่น alpha- และ beta-myosin heavy chainเซลล์ AC16 ยังแสดงโปรตีนช่องว่างระหว่างเซลล์ (gap junction) คือคอนเน็กซิน-43 (connexin-43) และคอนเน็กซิน-40 (connexin-40) โดยมีการยืนยันการทำงานของช่องว่างระหว่างเซลล์ผ่านการศึกษาการเชื่อมต่อด้วยสีย้อม ซึ่งเน้นย้ำถึงประโยชน์ในการวิจัยเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ เมื่อยีนก่อมะเร็ง SV40 ถูกปิดการทำงาน เซลล์ AC16 จะเปลี่ยนไปสู่สภาวะที่มีการเปลี่ยนแปลงมากขึ้น ซึ่งสังเกตได้จากการแสดงออกของ BMP2 ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้การเปลี่ยนเป็นเซลล์หัวใจและการควบคุมการพัฒนา

โดยทั่วไป นักวิทยาศาสตร์ใช้เทคนิคต่าง ๆ รวมถึงการแยกเซลล์ต้นกำเนิด (stem cell differentiation) แบบจำลองสัตว์ (animal models) การวิเคราะห์ระดับโมเลกุล (molecular analysis) และการค้นหาตัวบ่งชี้ทางชีวภาพ (biomarker discovery) เพื่อเพิ่มพูนความรู้และศักยภาพในการรักษาโรคที่เกี่ยวข้องกับหัวใจ การมีส่วนร่วมของเส้นทางเมตาเจน (mitogen) และเส้นทางชราภาพ (senescence pathways) ควบคู่กับการกระตุ้นไทมิดีนคิเนส (thymidine kinase induction) ช่วยอธิบายลักษณะที่ซับซ้อนของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจของมนุษย์ (cardiomyocytes) และการตอบสนองต่อภาวะโรคต่าง ๆ ได้ดีขึ้น

ความสามารถของเซลล์ไลน์ AC16 ของเซลล์คาร์ดิโอไมโอไซต์มนุษย์ในการเลียนแบบพฤติกรรมของเซลล์คาร์ดิโอไมโอไซต์ที่เจริญเต็มที่ ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยเกี่ยวกับหัวใจ มันมีความคล้ายคลึงกับโครงสร้างทางพันธุกรรมของเซลล์คาร์ดิโอไมโอไซต์ปฐมภูมิ ทำให้สามารถศึกษาการพัฒนาของหัวใจ, โรค, และผลกระทบของการสูญเสียฮิสโตนในหลอดทดลองได้ อย่างไรก็ตาม พฤติกรรมของเซลล์คาร์ดิโอไมโอไซต์และความซับซ้อนทางพันธุกรรมอาจไม่ตรงกับเซลล์คาร์ดิโอไมโอไซต์ปฐมภูมิหรือเซลล์คาร์ดิโอไมโอไซต์ที่ได้จากเซลล์ต้นกำเนิดอย่างสมบูรณ์ในบริบทของพิษวิทยาและการวิจัยโรคหัวใจและหลอดเลือด เซลล์ AC16 เป็นเครื่องมือสำคัญในการทำความเข้าใจการพัฒนาของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ การอักเสบ การบาดเจ็บ การฟื้นฟู และผลกระทบทางพิษวิทยา

คุณสมบัติเฉพาะของเซลล์ไลน์ AC16 ของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจมนุษย์ รวมถึงการตอบสนองต่อสัญญาณการพัฒนาและความสามารถในการจำลองสภาวะทางสรีรวิทยาของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจมนุษย์ ทำให้มันเป็นทรัพยากรที่ขาดไม่ได้ในการไขปริศนาของโรคหัวใจและคิดค้นวิธีการรักษาใหม่ๆ

อาหารเลี้ยงเชื้อ:DMEM: Ham's F12 (1:1), น้ำหนัก: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, น้ำหนัก: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, น้ำหนัก: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, น้ำหนัก: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, น้ำหนัก: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 12.5% และเติม L-Glutamine 0.9 มิลลิโมลาร์ เพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายของ L-Glutamine 2.5 มิลลิโมลาร์
ตัวกลางสำหรับการแยกความแตกต่าง:DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a).ในการเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับการแยกเชื้ออย่างสมบูรณ์ ให้เติม 1x ITS+ (Gibco, หมายเลขแคตตาล็อก 41400045) และเซรั่มม้า 2% (Gibco, หมายเลขแคตตาล็อก 16050130)

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.