AC16-kardiomyocytcellelinje

AC16-cellelinjen, som stammer fra humane ventrikelceller, der er fusioneret med SV40-transformerede, viser karakteristika, der er typiske for kardiomyocytter, herunder udtryk for transkriptionsfaktorer som GATA4, MYCD, NFATc4 og kontraktile proteiner som alfa- og beta-myosintunge kæder. AC16-celler udtrykker også gap junction-proteinerne connexin-43 og connexin-40, og funktionelle gap junctions er bekræftet ved hjælp af farvestofkoblingsstudier, hvilket understreger deres anvendelighed i kardiomyocytforskning. Når SV40-onkogenet dæmpes, overgår AC16 til en mere differentieret tilstand, der er præget af udtrykket af BMP2, som er et tegn på hjertedifferentiering og udviklingsregulering.

Generelt anvender forskere forskellige teknikker, herunder stamcelledifferentiering, dyremodeller, molekylær analyse og opdagelse af biomarkører, for at fremme viden og potentielle behandlinger af hjerterelaterede tilstande. Inddragelsen af mitogen- og senescensveje sammen med thymidinkinase-induktion belyser yderligere den komplekse natur af humane kardiomyocytter og deres reaktion på patologiske forhold.

Den humane AC16-kardiomyocytcellelinjes evne til at efterligne modne kardiomyocytters adfærd gør den til en værdifuld model for hjerteforskning. Den ligner i høj grad den genetiske sammensætning af primære kardiomyocytter, hvilket giver mulighed for undersøgelser af hjertets udvikling, patologi og konsekvenserne af histontab in vitro, men kardiomyocytternes adfærd og genetiske kompleksitet svarer måske ikke helt til primære eller stamcelleafledte kardiomyocytters. I forbindelse med forskning i toksikologi og hjerte-kar-sygdomme er AC16-celler et vigtigt redskab til at forstå kardiomyocytters udvikling, inflammation, skade, regenerering og toksikologiske effekter.

De unikke egenskaber ved den humane AC16-kardiomyocytcellelinje, herunder dens reaktion på udviklingsmæssige signaler og evnen til at simulere de fysiologiske forhold for humane kardiomyocytter, gør den til et uundværligt aktiv i forsøget på at opklare mysterierne ved hjertesygdomme og udtænke nye terapeutiske indgreb.

Kulturmedium:DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a). Suppler dyrkningsmediet med 12,5 % FBS og tilsæt 0,9 mM L-Glutamin for at opnå en endelig koncentration på 2,5 mM L-Glutamin
Differentieringsmedium: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a). For at forberede det komplette differentieringsmedium tilsættes 1x ITS+ (Gibco, katalognummer 41400045) og 2 % hesteserum (Gibco, katalognummer 16050130).

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring