Ga naar de inhoud
AC16-cardiomyocytencellijn
Weefsel
Hart, hartkamer
Synoniemen
Human hybrid cardiomyocyte

Documenten

AC16-cardiomyocytencellijn

Cell line · Productnummer 305215

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De AC16-cellijn, afgeleid van menselijke ventriculaire cellen gefuseerd met SV40-getransformeerd, vertoont typische kenmerken van cardiomyocyten, waaronder de expressie van transcriptiefactoren zoals GATA4, MYCD, NFATc4 en contractiele eiwitten zoals alfa- en bèta-myosine zware keten. AC16-cellen brengen ook de kloofjunctie-eiwitten connexine-43 en connexine-40 tot expressie, met functionele kloofjuncties die zijn bevestigd door kleurstofkoppelingsstudies, wat hun nut voor cardiomyocytenonderzoek onderstreept. Wanneer het SV40 oncogen wordt uitgeschakeld, verandert AC16 in een meer gedifferentieerde toestand, gekenmerkt door de expressie van BMP2, wat duidt op hartdifferentiatie en ontwikkelingsregulatie.

In het algemeen maken wetenschappers gebruik van verschillende technieken, waaronder stamceldifferentiatie, diermodellen, moleculaire analyse en de ontdekking van biomarkers, om de kennis en mogelijke therapieën voor hartgerelateerde aandoeningen te verbeteren. De betrokkenheid van mitogene en senescentiepaden, samen met thymidinekinase-inductie, verheldert de complexe aard van menselijke cardiomyocyten en hun respons op pathologische aandoeningen.

Het vermogen van de AC16 menselijke cardiomyocytencellijn om het gedrag van volwassen cardiomyocyten na te bootsen, maakt het een waardevol model voor hartonderzoek. De genetische samenstelling lijkt sterk op die van primaire cardiomyocyten, waardoor de ontwikkeling van het hart, pathologie en de implicaties van histonverlies in vitro kunnen worden bestudeerd. Het gedrag en de genetische complexiteit van de cardiomyocyten komen echter mogelijk niet volledig overeen met die van primaire of van stamcellen afgeleide cardiomyocyten. In de context van onderzoek naar toxicologie en hart- en vaatziekten vormen AC16-cellen een essentieel hulpmiddel om de ontwikkeling van cardiomyocyten, ontsteking, letsel, regeneratie en toxicologische effecten te begrijpen.

De unieke eigenschappen van de AC16 menselijke cardiomyocytencellijn, waaronder de reactie op ontwikkelingsstimuli en het vermogen om de fysiologische omstandigheden van menselijke cardiomyocyten te simuleren, maken deze cellijn onmisbaar bij de zoektocht naar het ontrafelen van de mysteries van hartziekten en het bedenken van nieuwe therapeutische interventies.

Weefsel
Hart, hartkamer
Toepassingen
Het onderzoek naar toxicologie en hart- en vaatziekten richt zich op het begrijpen van de ontwikkeling van cardiomyocyten, ontsteking, schade, regeneratie en toxicologische effecten. Wetenschappers gebruiken verschillende technieken, waaronder stamceldifferentiatie, diermodellen, moleculaire analyse en de ontdekking van biomarkers, om de kennis en mogelijke therapieën voor hartgerelateerde aandoeningen te verbeteren.
Synoniemen
  • Human hybrid cardiomyocyte

02Classificatie

Organisme
Mens
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This AC16-derived human cardiomyocyte cell line contains an SV40 T-Antigen construct introduced by transfection, supporting conditional immortalization. The construct is stably integrated into uridine-auxotrophic fibroblast-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Celtype
Cardiomyocyt

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
AC16-cardiomyocytencellijn (Cytion-catalogusnummer 305215)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4U18

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Getransformeerd door het SV40 grote T-antigeen

06Behandeling en kweek

Kweekmedium

Kweekmedium:DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a). Vul het kweekmedium aan met 12,5% FBS en voeg 0,9 mM L-Glutamine toe om een eindconcentratie van 2,5 mM L-Glutamine te bereiken
Differentiatiemedium: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a). Om het volledige differentiatiemedium te bereiden, voegt u 1x ITS+ (Gibco, catalogusnummer 41400045) en 2% Paardenserum (Gibco, catalogusnummer 16050130) toe.

Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Etnische afkomst
Kaukasisch

10Productgegevens

Overzichtstabel