AC16 kardiomiocītu šūnu līnija

AC16 šūnu līnijai, kas iegūta no cilvēka kambaru šūnām, kas sapludinātas ar SV40 transformētām, piemīt kardiomiocītiem raksturīgas īpašības, tostarp tādu transkripcijas faktoru kā GATA4, MYCD, NFATc4 un kontrakcijas proteīnu, piemēram, alfa- un beta- miozīna smagās ķēdes, ekspresija. AC16 šūnas arī ekspresē spraugas savienojuma proteīnus koneksīnu-43 un koneksīnu-40, un to funkcionālo plaisu savienojumu funkcionēšanu apstiprina krāsu savienošanas pētījumi, tādējādi uzsverot to lietderību kardiomiocītu pētniecībā. Ja SV40 onkogēns tiek apklusināts, AC16 pāriet uz diferencētāku stāvokli, ko raksturo BMP2 ekspresija, kas liecina par sirds diferenciāciju un attīstības regulāciju.

Kopumā zinātnieki izmanto dažādas metodes, tostarp cilmes šūnu diferenciāciju, dzīvnieku modeļus, molekulāro analīzi un biomarķieru atklāšanu, lai uzlabotu zināšanas un potenciālo terapiju ar sirdi saistītu slimību ārstēšanā. Mitogēnu un novecošanās ceļu iesaistīšana kopā ar timidīnkināzes indukciju vēl vairāk izskaidro cilvēka kardiomiocītu sarežģīto dabu un to reakciju uz patoloģiskiem apstākļiem.

AC16 cilvēka kardiomiocītu šūnu līnijas spēja imitēt nobriedušu kardiomiocītu uzvedību padara to par vērtīgu modeli kardioloģijas pētījumiem. Tā ļoti līdzinās primāro kardiomiocītu ģenētiskajam sastāvam, kas ļauj veikt pētījumus par sirds attīstību, patoloģiju un histonu zuduma ietekmi in vitro, tomēr kardiomiocītu uzvedība un ģenētiskā sarežģītība var pilnībā neatbilst primāro vai cilmes šūnu iegūto kardiomiocītu uzvedībai. Toksikoloģijas un sirds un asinsvadu slimību pētījumu kontekstā AC16 šūnas ir svarīgs instruments, lai izprastu kardiomiocītu attīstību, iekaisumu, bojājumus, reģenerāciju un toksikoloģisko ietekmi.

AC16 cilvēka kardiomiocītu šūnu līnijas unikālās īpašības, tostarp tās reakcija uz attīstības signāliem un spēja simulēt cilvēka kardiomiocītu fizioloģiskos apstākļus, padara to par neaizstājamu palīgu, lai atklātu sirds slimību noslēpumus un izstrādātu jaunas terapeitiskas iejaukšanās.

Kultūras barotne:DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a). Papildināt barotni ar 12,5 % FBS un pievienot 0,9 mM L-glutamīna, lai galējā koncentrācija būtu 2,5 mM L-glutamīna
Diferenciācijas barotne: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a). Lai sagatavotu pilnu diferenciācijas barotni, pievieno 1x ITS+ (Gibco, kataloga numurs 41400045) un 2% zirgu serumu (Gibco, kataloga numurs 16050130).

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu