AC16 Cardiomyocyte Cell Line

A linhagem celular AC16, derivada de células ventriculares humanas fundidas com células transformadas pelo SV40, apresenta características típicas dos cardiomiócitos, incluindo a expressão de fatores de transcrição como GATA4, MYCD e NFATc4, e de proteínas contráteis como as cadeias pesadas da alfa- e da beta-miosina. As células AC16 também expressam as proteínas de junção comunicante conexina-43 e conexina-40, com junções comunicantes funcionais confirmadas por estudos de acoplamento de corantes, o que ressalta sua utilidade na pesquisa com cardiomiócitos. Quando o oncogene SV40 é silenciado, as células AC16 transitam para um estado mais diferenciado, marcado pela expressão de BMP2, indicativa de diferenciação cardíaca e regulação do desenvolvimento.

Em geral, os cientistas empregam várias técnicas, incluindo diferenciação de células-tronco, modelos animais, análise molecular e descoberta de biomarcadores, para avançar no conhecimento e em possíveis terapias para doenças cardíacas. O envolvimento das vias mitogênicas e de senescência, juntamente com a indução da timidina quinase, elucida ainda mais a natureza complexa dos cardiomiócitos humanos e sua resposta a condições patológicas.

A capacidade da linhagem celular de cardiomiócitos humanos AC16 de imitar o comportamento de cardiomiócitos maduros a torna um modelo valioso para pesquisas cardíacas. Ela se assemelha muito à composição genética dos cardiomiócitos primários, permitindo estudos sobre o desenvolvimento cardíaco, a patologia e as implicações da perda de histonas in vitro; no entanto, o comportamento dos cardiomiócitos e a complexidade genética podem não corresponder totalmente aos dos cardiomiócitos primários ou derivados de células-tronco. No contexto da pesquisa em toxicologia e doenças cardiovasculares, as células AC16 servem como uma ferramenta vital para a compreensão do desenvolvimento, inflamação, lesão, regeneração e efeitos toxicológicos dos cardiomiócitos.

As propriedades únicas da linhagem celular de cardiomiócitos humanos AC16, incluindo sua resposta a sinais de desenvolvimento e a capacidade de simular as condições fisiológicas dos cardiomiócitos humanos, tornam-na um recurso indispensável na busca por desvendar os mistérios das doenças cardíacas e desenvolver novas intervenções terapêuticas.

Meio de cultura: DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p/v: 0,5 mM de piruvato de sódio, p/v: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a). Suplemente o meio de cultura com 12,5% de FBS e adicione 0,9 mM de L-glutamina para atingir uma concentração final de 2,5 mM de L-glutamina.
Meio de diferenciação: DMEM:F12 de Ham (1:1), p: 3,1 g/L de glicose, p: 2,5 mM de L-glutamina, p: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sódio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a). Para preparar o meio de diferenciação completo, adicione 1x ITS+ (Gibco, número de catálogo 41400045) e 2% de soro de cavalo (Gibco, número de catálogo 16050130).

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.