AC16 Cardiomyocyte Cell Line

La lignée cellulaire AC16, dérivée de cellules ventriculaires humaines fusionnées avec des cellules transformées par le SV40, présente les caractéristiques typiques des cardiomyocytes, notamment l’expression de facteurs de transcription tels que GATA4, MYCD et NFATc4, ainsi que de protéines contractiles comme les chaînes lourdes de la myosine alpha et bêta. Les cellules AC16 expriment également les protéines des jonctions communicantes, la connexine-43 et la connexine-40, dont la fonctionnalité a été confirmée par des études de couplage de colorants, ce qui souligne leur utilité dans la recherche sur les cardiomyocytes. Lorsque l’oncogène SV40 est inactivé, les cellules AC16 évoluent vers un état plus différencié, marqué par l’expression de BMP2, ce qui indique une différenciation cardiaque et une régulation du développement.

En général, les scientifiques ont recours à diverses techniques, notamment la différenciation des cellules souches, les modèles animaux, l’analyse moléculaire et la découverte de biomarqueurs, afin de faire progresser les connaissances et de développer des traitements potentiels pour les affections cardiaques. L’implication des voies mitogéniques et de la sénescence, ainsi que l’induction de la thymidine kinase, permet de mieux élucider la nature complexe des cardiomyocytes humains et leur réponse aux conditions pathologiques.

La capacité de la lignée cellulaire de cardiomyocytes humains AC16 à imiter le comportement des cardiomyocytes matures en fait un modèle précieux pour la recherche cardiaque. Elle ressemble étroitement au profil génétique des cardiomyocytes primaires, ce qui permet de mener des études sur le développement cardiaque, la pathologie et les implications de la perte d’histones in vitro; toutefois, le comportement des cardiomyocytes et leur complexité génétique pourraient ne pas correspondre entièrement à ceux des cardiomyocytes primaires ou dérivés de cellules souches. Dans le contexte de la recherche en toxicologie et sur les maladies cardiovasculaires, les cellules AC16 constituent un outil essentiel pour comprendre le développement, l’inflammation, les lésions, la régénération et les effets toxicologiques des cardiomyocytes.

Les propriétés uniques de la lignée cellulaire de cardiomyocytes humains AC16, notamment sa réponse aux signaux de développement et sa capacité à reproduire les conditions physiologiques des cardiomyocytes humains, en font un atout indispensable dans la quête visant à percer les mystères des maladies cardiaques et à mettre au point de nouvelles interventions thérapeutiques.

Milieu de culture : DMEM :F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, p/v : 0,5 mM de pyruvate de sodium, p/v : 1,2 g/L de NaHCO₃ (numéro d’article Cytion 820400a). Compléter le milieu de culture avec 12,5 % de sérum fœtal bovin (FBS) et ajouter 0,9 mM de L-glutamine pour atteindre une concentration finale de 2,5 mM de L-glutamine.
Milieu de différenciation : DMEM :F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, p/v : 0,5 mM de pyruvate de sodium, p/v : 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a). Pour préparer le milieu de différenciation complet, ajouter du 1x ITS+ (Gibco, référence 41400045) et 2 % de sérum de cheval (Gibco, référence 16050130).

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.