
- Tissu
- Moelle osseuse
- Maladie
- Leucémie myéloïde chronique
- Synonymes
- Meg-01, MEG01, Meg01
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MEG-01
Cell line · Référence du produit 300482
The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...
Personnalisation / Recommandations
- MEG-01Cell line€430.00
Recommandé (lot le plus récent)
01Informations générales
- Description
La lignée cellulaire MEG-01 est une lignée de mégacaryoblastes humains provenant de la moelle osseuse d'un patient de 55 ans qui se trouvait dans la phase de crise mégacaryoblastique de la leucémie myélogène chronique (LMC). Cette lignée cellulaire a été développée en 1983 à l'école de médecine de l'université de Nagoya, au Japon. Le patient dont MEG-01 est issue était positif pour le chromosome Philadelphie (Ph1), une caractéristique de la LMC. Les cellules MEG-01 présentent un caryotype hyperdiploïde avec un nombre modal de chromosomes de 56 à 58, montrant de façon constante la présence du chromosome Ph1, qui résulte de la translocation chromosomique t(9;22).
Les cellules MEG-01 ont des propriétés de croissance mixtes, présentant à la fois des caractéristiques d'adhérence et de suspension en culture. Ces cellules expriment plusieurs marqueurs et antigènes caractéristiques de la lignée mégacaryocytaire, notamment CD41, CD61 et CDw14. Elles sont également positives pour le facteur VIII cytoplasmique, la GPIIb/IIIa de surface et diverses activités enzymatiques telles que la réaction périodique acide-Schiff (PAS), l'acétate estérase alpha-naphtyle et la phosphatase acide. Il est intéressant de noter que les cellules MEG-01 sont négatives pour la myéloperoxydase, l'alpha naphthyl butyrate estérase, la naphthol AS-D chloroacétate estérase et la phosphatase alcaline, ce qui permet de les distinguer des autres cellules myéloïdes.
MEG-01 est un modèle précieux pour l'étude de la mégacaryopoïèse humaine, de la production de plaquettes et de la biosynthèse de protéines propres à la lignée mégacaryocytaire, telles que le facteur de croissance dérivé des plaquettes (PDGF) et des glycoprotéines comme la GPIIb/IIIa. En raison de son bagage génétique bien caractérisé et de sa capacité à exprimer les principaux marqueurs mégacaryocytaires, MEG-01 constitue un outil important pour l'étude des mécanismes de la leucémie et de la biogenèse plaquettaire, bien qu'il ne soit pas destiné à des applications thérapeutiques ou in vivo.
- Tissu
- Moelle osseuse
- Maladie
- Leucémie myéloïde chronique
- Synonymes
- Meg-01
- MEG01
- Meg01
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Homme
- Propriétés de croissance
- Adhérent et en suspension
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- De type myoblaste
- Type de cellule
- Mégacaryoblaste
04Identifiants
- Référence
- MEG-01 (numéro de catalogue Cytion 300482)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0425
05Expression et sensibilité
- Expression des antigènes
- CD41 +, CD61 +, CDw14 +
06Manipulation et culture
- Milieu de culture
- RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10% de FBS
- Réactif de dissociation
- Accutase
- Repiquage
- Rassembler les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et laver délicatement les cellules adhérentes avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium (utiliser 3-5 ml pour les flacons T25 et 5-10 ml pour les flacons T75). Appliquer Accutase (1-2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à couvrir entièrement la couche cellulaire. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l'incubation, combiner et centrifuger la suspension et les cellules adhérentes. Après centrifugation, remettre soigneusement en suspension le culot cellulaire et transférer la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donateur
- Âge du donneur
- 55 ans
- Origine ethnique
- Asie de l'Est
09Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Un accord de transfert de matériel est requis
- Oui