Preskoči na vsebino
MEG-01
Tkivo
Kostni mozeg
Bolezen
Kronična mieloična levkemija
Sinonimi
Meg-01, MEG01, Meg01

Dokumenti

MEG-01

Cell line · Številka izdelka 300482

The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija MEG-01 je človeška megakarioblastna celična linija, pridobljena iz kostnega mozga 55-letnega bolnika, ki je bil v fazi megakarioblastne krize kronične mieloične levkemije (KML). Ta celična linija je bila razvita leta 1983 na Medicinski fakulteti Univerze Nagoya na Japonskem. Bolnik, iz katerega je bila pridobljena MEG-01, je bil pozitiven na kromosom Philadelphia (Ph1), ki je značilen za KML. Celice MEG-01 imajo hiperdiploidni kariotip z modalnim številom kromosomov od 56 do 58, pri čemer se dosledno kaže prisotnost kromosoma Ph1, ki je posledica kromosomske translokacije t(9;22).

Celice MEG-01 imajo mešane rastne lastnosti, saj imajo v kulturi tako adherentne kot suspenzijske lastnosti. Te celice izražajo več označevalcev in antigenov, značilnih za megakariocitno linijo, vključno s CD41, CD61 in CDw14. Pozitivne so tudi na citoplazemski faktor VIII, površinske GPIIb/IIIa in različne encimske aktivnosti, kot so reakcija periodične kisline-Schiffa (PAS), alfa naftil acetat esteraza in kisla fosfataza. Zanimivo je, da so celice MEG-01 negativne na mieloperoksidazo, alfa naftil butirat esterazo, naftol AS-D kloroacetat esterazo in alkalno fosfatazo, kar jih razlikuje od drugih mieloidnih celic.

MEG-01 je dragocen model za preučevanje človeške megakariopoeze, proizvodnje trombocitov in biosinteze beljakovin, značilnih za megakariocitno linijo, kot so trombocitni rastni faktor (PDGF) in glikoproteini, kot so GPIIb/IIIa. Zaradi dobro opisanega genetskega ozadja in sposobnosti izražanja ključnih megakariocitnih označevalcev je MEG-01 pomembno orodje za raziskovanje levkemije in mehanizmov biogeneze trombocitov, čeprav ni namenjen za terapevtsko uporabo ali uporabo in vivo.

Tkivo
Kostni mozeg
Bolezen
Kronična mieloična levkemija
Sinonimi
  • Meg-01
  • MEG01
  • Meg01

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Adhezivni in suspenzijski
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Mioblastom podobni
Vrsta celice
Megakarioblast

04Identifikatorji

Navajanje vira
MEG-01 (Cytionova kataloška številka 300482)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0425

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
CD41 +, CD61 +, CDw14 +

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
V 15 ml epruveti zberite suspenzijske celice in jih nežno sperite s PBS brez kalcija in magnezija (uporabite 3-5 ml za bučke T25 in 5-10 ml za bučke T75). Uporabite Accutase (1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75), tako da popolnoma prekrijete plast celic. Počakajte, da se celice inkubirajo pri sobni temperaturi 10 minut. Po inkubaciji združite in centrifugirajte suspenzijo in adherentne celice. Po centrifugiranju previdno ponovno suspendirajte celično peleto in celično suspenzijo prenesite v nove bučke s svežim gojiščem.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
55 let
Etnična pripadnost
Vzhodna Azija