MEG-01

MEG-01-cellelinjen er en human megakaryoblast-cellelinje, der er etableret fra knoglemarven hos en 55-årig mandlig patient, som var i den megakaryoblastiske krisefase af kronisk myelogen leukæmi (CML). Denne cellelinje blev udviklet i 1983 på Nagoya University School of Medicine i Japan. Den patient, som MEG-01 stammer fra, var positiv for Philadelphia-kromosomet (Ph1), som er et kendetegn for CML. MEG-01-cellerne udviser en hyperdiploid karyotype med et modalt kromosomtal på 56 til 58, hvilket konsekvent viser tilstedeværelsen af Ph1-kromosomet, som er et resultat af den kromosomale translokation t(9;22).

MEG-01-celler har blandede vækstegenskaber og udviser både adhærente og suspenderede egenskaber i kultur. Disse celler udtrykker flere markører og antigener, der er karakteristiske for den megakaryocytiske linje, herunder CD41, CD61 og CDw14. De tester også positivt for cytoplasmatisk faktor VIII, overflade GPIIb/IIIa og forskellige enzymatiske aktiviteter såsom periodisk syre-Schiff (PAS)-reaktion, alfa-naphthylacetatesterase og syrephosphatase. Interessant nok er MEG-01-celler negative for myeloperoxidase, alfa-naphthylbutyratesterase, naphthol AS-D-chloracetatesterase og alkalisk fosfatase, hvilket er med til at adskille dem fra andre myeloide celler.

MEG-01 har været en værdifuld model til at studere human megakaryopoiese, blodpladeproduktion og biosyntese af proteiner, der er unikke for den megakaryocytiske linje, såsom blodpladeafledt vækstfaktor (PDGF) og glykoproteiner som GPIIb/IIIa. På grund af sin velkarakteriserede genetiske baggrund og sin evne til at udtrykke vigtige megakaryocytmarkører fungerer MEG-01 som et vigtigt værktøj i undersøgelsen af leukæmi og blodpladebiogenesemekanismer, selv om det ikke er beregnet til terapeutiske eller in vivo-anvendelser.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring