Skip to content
MEG-01
Tissue
מח עצם
Disease
לוקמיה מיאלואידית כרונית
Synonyms
Meg-01, MEG01, Meg01

Documents

MEG-01

Cell line · Product number 300482

The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים MEG-01 הוא קו תאים מגקריובלסטים אנושיים שהוקם ממח העצם של חולה בן 55 שהיה בשלב משבר מגקריובלסטי של לוקמיה מיאלואידית כרונית (CML). קו תאים זה פותח בשנת 1983 בבית הספר לרפואה של אוניברסיטת נגויה, יפן. החולה שממנו נלקח MEG-01 היה חיובי לכרומוזום פילדלפיה (Ph1), סימן היכר של CML. תאי MEG-01 מציגים קריוטיפ היפרדיפלואידי עם מספר כרומוזומים מודאלי של 56 עד 58, ומראים באופן עקבי נוכחות של כרומוזום Ph1, שהוא תוצאה של טרנסלוקציה כרומוזומלית t(9;22).

לתאי MEG-01 תכונות גדילה מעורבות, והם מפגינים מאפיינים של היצמדות ושל תלייה בתרבית. תאים אלה מבטאים מספר סמנים ואנטיגנים האופייניים לשושלת מגקריוציטית, כולל CD41, CD61 ו-CDw14. הם גם נבדקו חיוביים לגורם VIII ציטופלזמי, GPIIb/IIIa שטחי, ופעילויות אנזימטיות שונות כגון תגובת חומצה תקופתית-שיף (PAS), אלפא נפתיל אצטט אסטראז, ופאוספטאז חומצי. מעניין לציין שתאי MEG-01 נבדקו כשליליים למיאלופרוקסידאז, אלפא נפתיל בוטיראט אסטראז, נפתול AS-D כלורואצטאט אסטראז ואלקליין פוספטאז, מה שמסייע להבדיל בינם לבין תאים מיאלואידיים אחרים.

MEG-01 מהווה מודל חשוב לחקר מגקריופויזיס אנושי, ייצור טסיות דם וביוסינתזה של חלבונים ייחודיים לשושלת המגקריוציטים, כגון גורם גדילה שמקורו בטסיות דם (PDGF) וגליקופרוטאינים כגון GPIIb/IIIa. בזכות הרקע הגנטי המאופיין היטב שלו ויכולתו לבטא סמנים מרכזיים של מגקריוציטים, MEG-01 משמש ככלי משמעותי בחקר מנגנוני לוקמיה וביוגנזה של טסיות דם, אף שהוא אינו מיועד ליישומים טיפוליים או in vivo.

Tissue
מח עצם
Disease
לוקמיה מיאלואידית כרונית
Synonyms
  • Meg-01
  • MEG01
  • Meg01

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי מיובלסט
Cell type
מגקריובלסט

04Identifiers

Citation
MEG-01 (מספר קטלוגי Cytion 300482)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0425

05Expression and susceptibility

Antigen expression
CD41+, CD61+, CDw14+

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
55 שנים
Ethnicity
מזרח אסיה