MEG-01

La linea cellulare MEG-01 è una linea cellulare di megacarioblasti umani ottenuta dal midollo osseo di un paziente maschio di 55 anni che si trovava nella fase di crisi megacarioblastica della leucemia mieloide cronica (LMC). Questa linea cellulare è stata sviluppata nel 1983 presso la Nagoya University School of Medicine, in Giappone. Il paziente da cui è stata derivata la MEG-01 era positivo al cromosoma Philadelphia (Ph1), un segno distintivo della LMC. Le cellule MEG-01 presentano un cariotipo iperdiploide con un numero modale di cromosomi compreso tra 56 e 58, mostrando costantemente la presenza del cromosoma Ph1, risultato della traslocazione cromosomica t(9;22).

Le cellule MEG-01 hanno proprietà di crescita miste, dimostrando caratteristiche di aderenza e sospensione in coltura. Queste cellule esprimono diversi marcatori e antigeni caratteristici del lignaggio megacariocitico, tra cui CD41, CD61 e CDw14. Sono inoltre positive al Fattore VIII citoplasmatico, alla GPIIb/IIIa di superficie e a varie attività enzimatiche come la reazione periodica acido-Schiff (PAS), l'alfa naftil acetato esterasi e la fosfatasi acida. È interessante notare che le cellule MEG-01 sono negative alla mieloperossidasi, all'alfa naftilbutirrato esterasi, al naftolo AS-D cloroacetato esterasi e alla fosfatasi alcalina, il che contribuisce a distinguerle da altre cellule mieloidi.

Il MEG-01 è stato un modello prezioso per lo studio della megacariogenesi umana, della produzione di piastrine e della biosintesi di proteine esclusive del lignaggio megacariocitico, come il fattore di crescita derivato dalle piastrine (PDGF) e glicoproteine come la GPIIb/IIIa. Grazie al suo background genetico ben caratterizzato e alla sua capacità di esprimere marcatori megacariocitari chiave, MEG-01 è uno strumento importante per lo studio della leucemia e dei meccanismi di biogenesi piastrinica, sebbene non sia destinato ad applicazioni terapeutiche o in vivo.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia