الانتقال إلى المحتوى
MEG-01
الأنسجة
النخاع العظمي
المرض
ابيضاض الدم النخاعي المزمن
المرادفات
Meg-01, MEG01, Meg01

المستندات

MEG-01

Cell line · رقم المنتج 300482

The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

إن خط الخلايا MEG-01 هو خط خلايا الأرومة النخاعية النخاعية البشرية الذي تم إنشاؤه من نخاع عظم مريض يبلغ من العمر 55 عاماً كان في مرحلة أزمة الأرومة النخاعية النخاعية في سرطان الدم النقوي المزمن (CML). تم تطوير هذا الخط الخلوي في عام 1983 في كلية الطب بجامعة ناغويا، اليابان. كان المريض الذي تم اشتقاق MEG-01 منه إيجابيًا بالنسبة لكروموسوم فيلادلفيا (Ph1)، وهي سمة مميزة لسرطان الدم النخاعي المزمن. تُظهر خلايا MEG-01 نمطاً كروموسومياً مفرط الازدواج الصبغي مع عدد كروموسومات نموذجي يتراوح بين 56 و58، ويظهر باستمرار وجود كروموسوم Ph1، وهو نتيجة للانتقال الصبغي t(9;22).

تتميز خلايا MEG-01 بخصائص نمو مختلطة، حيث تُظهر خصائص ملتصقة ومعلقة في المزرعة. وتعبر هذه الخلايا عن العديد من العلامات والمستضدات المميزة لسلالة النخاع الشوكي النخاعي، بما في ذلك CD41 وCD61 وCDw14. كما أن اختبارها إيجابي بالنسبة إلى العامل الثامن السيتوبلازمي والسطحي GPIIb/IIIa، والعديد من الأنشطة الأنزيمية مثل تفاعل حمض شيف الدوري (PAS) وتفاعل حمض ألفا نفتيل أسيتات استريز وفوسفاتيز الحمض. ومن المثير للاهتمام أن خلايا MEG-01 سلبية بالنسبة إلى إنزيمات نافثيل بيروكسيديز وإستريز ألفا نافثيل بوتيرات وإستريز كلورواسيتات النفثول AS-D وإستريز كلورواسيتات والفوسفاتاز القلوي، مما يساعد على تمييزها عن الخلايا النخاعية الأخرى.

لقد كان MEG-01 نموذجاً قيماً لدراسة تكوّن النخاع النخاعي البشري وإنتاج الصفائح الدموية والتخليق الحيوي للبروتينات الفريدة من نوعها في سلالة النخاع النخاعي، مثل عامل النمو المشتق من الصفائح الدموية (PDGF) والبروتينات السكرية مثل GPIIb/IIIa. ونظراً لخلفيته الوراثية المميّزة وقدرته على التعبير عن علامات الخلايا النخاعية الرئيسية فإن MEG-01 يُستخدم كأداة مهمة في التحقيق في سرطان الدم وآليات التكوّن الحيوي للصفائح الدموية، على الرغم من أنه غير مخصص للتطبيقات العلاجية أو في الجسم الحي.

الأنسجة
النخاع العظمي
المرض
ابيضاض الدم النخاعي المزمن
المرادفات
  • Meg-01
  • MEG01
  • Meg01

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التثبيت والتعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالأرومة العضلية
نوع الخلية
ميجاكاريوبلاست

04المعرّفات

المرجع
MEG-01 (كتالوج سيتيون رقم 300482)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0425

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
CD41 +، CD61 +، CDW14 +، CDW14 +

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
55 سنة
الأصل العرقي
شرق آسيا