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MEG-01
ティッシュ
骨髄
病気
慢性骨髄性白血病
同義語
Meg-01, MEG01, Meg01

MEG-01

Cell line · 製品番号 300482

The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...

€430.00税・送料別

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01概要

説明

MEG-01細胞株は、慢性骨髄性白血病(CML)の巨核芽球クリーゼ期にあった55歳の男性患者の骨髄から樹立されたヒト巨核芽球細胞株である。この細胞株は1983年に名古屋大学医学部で開発された。MEG-01の由来となった患者は、CMLの特徴であるフィラデルフィア染色体(Ph1)陽性であった。MEG-01細胞は、染色体数56~58の超2倍体核型を示し、t(9;22)染色体転座の結果であるPh1染色体の存在を一貫して示している。

MEG-01細胞は混合増殖性を示し、培養では接着性と浮遊性の両方の性質を示す。これらの細胞はCD41、CD61、CDw14など巨核球系に特徴的ないくつかのマーカーや抗原を発現している。また、細胞質第VIII因子、表面GPIIb/IIIa、過ヨウ素酸シッフ(PAS)反応、αナフチル酢酸エステラーゼ、酸性ホスファターゼなどの酵素活性も陽性である。興味深いことに、MEG-01細胞はミエロペルオキシダーゼ、αナフチル酪酸エステラーゼ、ナフトールAS-Dクロロ酢酸エステラーゼ、アルカリホスファターゼが陰性であり、他の骨髄系細胞との区別に役立っている。

MEG-01は、ヒト巨核球形成、血小板産生、および血小板由来成長因子(PDGF)やGPIIb/IIIaのような糖タンパク質のような巨核球系に特有のタンパク質の生合成を研究するための貴重なモデルであった。MEG-01は、その特徴的な遺伝的背景と主要な巨核球マーカーを発現する能力により、白血病と血小板の生合成メカニズムの研究において重要なツールとなっているが、治療やin vivoでの応用は意図されていない。

ティッシュ
骨髄
病気
慢性骨髄性白血病
同義語
  • Meg-01
  • MEG01
  • Meg01

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
付着状態および浮遊状態
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
筋芽細胞様
細胞の種類
メガカリオブラスト

04識別子

引用
MEG-01 (Cytion カタログ番号 300482)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0425

05発現と感受性

抗原発現
CD41+、CD61+、CDw14+。

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
浮遊細胞を15 mlチューブに集め、カルシウムとマグネシウムを欠いたPBSで付着細胞を穏やかに洗浄する(T25フラスコでは3~5 ml、T75フラスコでは5~10 mlを使用)。アキュターゼ(T25フラスコでは1-2 ml、T75フラスコでは2.5 ml)を、細胞層を完全に覆うように塗布する。細胞を室温で10分間インキュベートする。インキュベーション後、懸濁液と接着細胞の両方を合わせて遠心する。遠心後、細胞ペレットを注意深く懸濁し、細胞懸濁液を新しい培地の入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
55年
民族
イースト・アジアン