MEG-01

MEG-01-solulinja on ihmisen megakaryoblastisolulinja, joka on peräisin 55-vuotiaan miespotilaan luuytimestä, joka oli kroonisen myelooisen leukemian (CML) megakaryoblastisessa kriisivaiheessa. Tämä solulinja kehitettiin vuonna 1983 Nagoyan yliopiston lääketieteellisessä tiedekunnassa Japanissa. Potilaalla, josta MEG-01 oli peräisin, oli positiivinen Philadelphia-kromosomi (Ph1), joka on CML:n tunnusmerkki. MEG-01:n soluilla on hyperdiploidinen karyotyyppi, jonka modaalinen kromosomiluku on 56-58, ja niissä esiintyy jatkuvasti Ph1-kromosomia, joka on seurausta t(9;22)-kromosomitranslokaatiosta.

MEG-01:n soluilla on sekalaiset kasvuominaisuudet, ja niillä on sekä tarttuvia että suspensio-ominaisuuksia viljelyssä. Nämä solut ilmentävät useita megakaryosyyttilinjalle tyypillisiä merkkiaineita ja antigeenejä, kuten CD41, CD61 ja CDw14. Ne ovat myös positiivisia sytoplasmisen VIII-tekijän, pinta-GPIIb/IIIa:n ja erilaisten entsymaattisten aktiivisuuksien, kuten PAS-reaktion (periodic acid-Schiff), alfa-naftyyliasetaattiesteraasin ja happaman fosfataasin suhteen. Mielenkiintoista on, että MEG-01-solut ovat negatiivisia myeloperoksidaasin, alfa-naftyylibutyraattiesteraasin, naftoli-AS-D-klooriasetaattiesteraasin ja emäksisen fosfataasin suhteen, mikä auttaa erottamaan ne muista myelooisista soluista.

MEG-01 on ollut arvokas malli tutkittaessa ihmisen megakaryopoieesia, verihiutaleiden tuotantoa ja megakaryosyyttilinjalle ominaisten proteiinien, kuten verihiutaleista peräisin olevan kasvutekijän (PDGF) ja glykoproteiinien, kuten GPIIb/IIIa:n, biosynteesiä. Koska MEG-01:n geneettinen tausta on hyvin karakterisoitu ja se kykenee ilmentämään keskeisiä megakaryosyyttien merkkiaineita, se toimii merkittävänä välineenä leukemian ja verihiutaleiden biogeneesimekanismien tutkimisessa, vaikka sitä ei ole tarkoitettu terapeuttisiin tai in vivo -sovelluksiin.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa