MEG-01

La línea celular MEG-01 es una línea de megacarioblastos humanos obtenida a partir de la médula ósea de un paciente varón de 55 años que se encontraba en la fase de crisis megacarioblástica de la leucemia mielógena crónica (LMC). Esta línea celular se desarrolló en 1983 en la Facultad de Medicina de la Universidad de Nagoya, Japón. El paciente del cual se derivó la MEG-01 dio positivo para el cromosoma Filadelfia (Ph1), un rasgo característico de la LMC. Las células MEG-01 presentan un cariotipo hiperdiploide con un número modal de cromosomas de 56 a 58, y muestran de manera constante la presencia del cromosoma Ph1, que es el resultado de la translocación cromosómica t(9;22).

Las células MEG-01 tienen propiedades de crecimiento mixtas, ya que muestran características tanto de adhesión como de suspensión en cultivo. Estas células expresan varios marcadores y antígenos característicos del linaje megacariocítico, entre ellos CD41, CD61 y CDw14. También dan positivo para el factor VIII citoplasmático, GPIIb/IIIa de superficie y diversas actividades enzimáticas, como la reacción de ácido periódico de Schiff (PAS), la alfa-naftilacetatoesterasa y la fosfatasa ácida. Curiosamente, las células MEG-01 dan negativo para la mieloperoxidasa, la alfa-naftilbutiratoesterasa, la naftol AS-D cloroacetatoesterasa y la fosfatasa alcalina, lo que ayuda a distinguirlas de otras células mieloides.

MEG-01 ha sido un modelo valioso para estudiar la megacariopoyesis humana, la producción de plaquetas y la biosíntesis de proteínas exclusivas del linaje megacariocítico, como el factor de crecimiento derivado de las plaquetas (PDGF) y glicoproteínas como la GPIIb/IIIa. Debido a su fondo genético bien caracterizado y a su capacidad para expresar marcadores clave de los megacariocitos, el MEG-01 sirve como una herramienta importante en la investigación de la leucemia y los mecanismos de biogénesis de las plaquetas, aunque no está destinado a aplicaciones terapéuticas ni in vivo.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.