MEG-01

A linha celular MEG-01 é uma linha celular de megacarioblastos humanos estabelecida a partir da medula óssea de um doente do sexo masculino de 55 anos de idade que se encontrava na fase de crise megacarioblástica da Leucemia Mielogénica Crónica (LMC). Esta linha celular foi desenvolvida em 1983 na Faculdade de Medicina da Universidade de Nagoya, Japão. O doente do qual a MEG-01 foi derivada era positivo para o cromossoma Filadélfia (Ph1), uma caraterística distintiva da LMC. As células MEG-01 apresentam um cariótipo hiperdiplóide com um número cromossómico modal de 56 a 58, mostrando consistentemente a presença do cromossoma Ph1, que resulta da translocação cromossómica t(9;22).

As células MEG-01 têm propriedades de crescimento mistas, demonstrando tanto caraterísticas aderentes como de suspensão em cultura. Estas células expressam vários marcadores e antigénios caraterísticos da linhagem megacariocítica, incluindo CD41, CD61 e CDw14. Também apresentam resultados positivos para o Fator VIII citoplasmático, GPIIb/IIIa de superfície e várias actividades enzimáticas, como a reação de ácido periódico de Schiff (PAS), a alfa naftil acetato esterase e a fosfatase ácida. É interessante notar que as células MEG-01 são negativas para mieloperoxidase, alfa naftil butirato esterase, naftol AS-D cloroacetato esterase e fosfatase alcalina, o que ajuda a distingui-las de outras células mieloides.

A MEG-01 tem sido um modelo valioso para estudar a megacariopoiese humana, a produção de plaquetas e a biossíntese de proteínas exclusivas da linhagem megacariocítica, como o fator de crescimento derivado das plaquetas (PDGF) e glicoproteínas como a GPIIb/IIIa. Devido ao seu fundo genético bem caracterizado e à sua capacidade de expressar marcadores chave dos megacariócitos, o MEG-01 serve como uma ferramenta importante na investigação da leucemia e dos mecanismos de biogénese plaquetária, embora não se destine a aplicações terapêuticas ou in vivo.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia