Skip to content
MEG-01
Tissue
ไขกระดูก
Disease
โรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเรื้อรัง
Synonyms
Meg-01, MEG01, Meg01

Documents

MEG-01

Cell line · Product number 300482

The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ MEG-01 เป็นสายเซลล์เมกาคาริโอบลาสต์ของมนุษย์ที่สร้างขึ้นจากไขกระดูกของผู้ป่วยชายอายุ 55 ปี ซึ่งอยู่ในระยะวิกฤตเมกาคาริโอบลาสติกของโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวเรื้อรังชนิดไมอีลอยด์ (CML) สายเซลล์นี้ได้รับการพัฒนาขึ้นในปี พ.ศ. 2526 ที่คณะแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยนาโกยา ประเทศญี่ปุ่นผู้ป่วยที่ MEG-01 ถูกพัฒนาขึ้นมาจากมีผลบวกต่อโครโมโซมฟิลาเดลเฟีย (Ph1) ซึ่งเป็นลักษณะเด่นของ CML เซลล์ MEG-01 แสดงลักษณะทางโครโมโซมแบบไฮเปอร์ไดพลอยด์ โดยมีจำนวนโครโมโซมแบบโมดัลอยู่ที่ 56 ถึง 58 ตัว และแสดงการมีอยู่ของโครโมโซม Ph1 อย่างสม่ำเสมอ ซึ่งเป็นผลมาจากการสลับตำแหน่งของโครโมโซม t(9;22)

เซลล์ MEG-01 มีคุณสมบัติการเจริญเติบโตแบบผสม แสดงลักษณะทั้งการเกาะติดและการลอยตัวในวัฒนธรรมเซลล์เหล่านี้แสดงตัวบ่งชี้และแอนติเจนหลายชนิดที่เป็นลักษณะเฉพาะของสายพันธุ์เมกาคารีโอไซต์ รวมถึง CD41, CD61 และ CDw14 นอกจากนี้ยังทดสอบผลบวกสำหรับแฟคเตอร์ VIII ในไซโตพลาซึม, GPIIb/IIIa บนผิวเซลล์ และกิจกรรมเอนไซม์ต่างๆ เช่น ปฏิกิริยาพีเรียดิกแอซิด-ชิฟฟ์ (PAS), อัลฟาแนฟทิลอะซิเตตเอสเทอเรส และแอซิดฟอสฟาเตสที่น่าสนใจคือ เซลล์ MEG-01 ให้ผลลบต่อเอนไซม์ไมอีโลเปอร์ออกซิเดส, อัลฟาแนฟทิลบิวทิเรตเอสเทอเรส, แนฟทอล AS-D คลอโรอะซีเตตเอสเทอเรส และอัลคาไลน์ฟอสฟาเตส ซึ่งช่วยในการแยกแยะเซลล์เหล่านี้จากเซลล์ไมอีลอยด์ชนิดอื่น

MEG-01 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการสร้างเมกาคารีโอไซต์ในมนุษย์ การผลิตเกล็ดเลือด และการสังเคราะห์โปรตีนเฉพาะในสายเมกาคารีโอไซต์ เช่น ปัจจัยการเจริญเติบโตจากเกล็ดเลือด (PDGF) และไกลโคโปรตีนอย่าง GPIIb/IIIaเนื่องจากมีพื้นฐานทางพันธุกรรมที่ชัดเจนและความสามารถในการแสดงออกของตัวบ่งชี้เมกะคาริโอไซต์ที่สำคัญ MEG-01 จึงเป็นเครื่องมือสำคัญในการศึกษาวิจัยเกี่ยวกับกลไกการเกิดโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวและการสร้างเกล็ดเลือดใหม่ แม้ว่าจะไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในทางการรักษาหรือการทดลองในสิ่งมีชีวิตก็ตาม

Tissue
ไขกระดูก
Disease
โรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเรื้อรัง
Synonyms
  • Meg-01
  • MEG01
  • Meg01

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายเซลล์ไมโอบลาสต์
Cell type
เมกะคาริโอบลาสต์

04Identifiers

Citation
MEG-01 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300482)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0425

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ซีดี41บวก, ซีดี61บวก, ซีดีดับเบิลยู14บวก

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
55 ปี
Ethnicity
เอเชียตะวันออก