
- Tkanivo
- Kostná dreň
- Choroba
- Chronická myeloidná leukémia
- Synonymá
- Meg-01, MEG01, Meg01
Dokumenty
MEG-01
Cell line · Číslo výrobku 300482
The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...
Prispôsobenie / Odporúčania
- MEG-01Cell line€430.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
Bunková línia MEG-01 je ľudská megakaryoblastová bunková línia vytvorená z kostnej drene 55-ročného muža, ktorý bol vo fáze megakaryoblastickej krízy chronickej myelogénnej leukémie (CML). Táto bunková línia bola vyvinutá v roku 1983 na Nagoya University School of Medicine v Japonsku. Pacient, od ktorého bola MEG-01 odvodená, bol pozitívny na chromozóm Philadelphia (Ph1), ktorý je charakteristickým znakom CML. Bunky MEG-01 vykazujú hyperdiploidný karyotyp s modálnym počtom chromozómov 56 až 58, pričom dôsledne vykazujú prítomnosť chromozómu Ph1, ktorý je výsledkom chromozomálnej translokácie t(9;22).
Bunky MEG-01 majú zmiešané rastové vlastnosti a v kultúre vykazujú adherentné aj suspenzné charakteristiky. Tieto bunky exprimujú niekoľko markerov a antigénov charakteristických pre megakaryocytovú líniu vrátane CD41, CD61 a CDw14. Sú tiež pozitívne na cytoplazmatický faktor VIII, povrchové GPIIb/IIIa a rôzne enzymatické aktivity, ako je periodická kyslá Schiffova reakcia (PAS), alfa-naftylacetátesteráza a kyslá fosfatáza. Zaujímavé je, že bunky MEG-01 sú negatívne na myeloperoxidázu, alfa naftylbutyrát esterázu, naftol AS-D chloroacetát esterázu a alkalickú fosfatázu, čo ich pomáha odlíšiť od iných myeloidných buniek.
MEG-01 je cenným modelom na štúdium ľudskej megakaryopoézy, produkcie krvných doštičiek a biosyntézy proteínov jedinečných pre megakaryocytovú líniu, ako je rastový faktor odvodený od krvných doštičiek (PDGF) a glykoproteíny ako GPIIb/IIIa. Vďaka dobre charakterizovanému genetickému pozadiu a schopnosti exprimovať kľúčové megakaryocytárne markery slúži MEG-01 ako významný nástroj pri skúmaní mechanizmov leukémie a biogenézy trombocytov, hoci nie je určený na terapeutické alebo in vivo aplikácie.
- Tkanivo
- Kostná dreň
- Choroba
- Chronická myeloidná leukémia
- Synonymá
- Meg-01
- MEG01
- Meg01
02Klasifikácia
- Organizmus
- Človek
- Sex
- Muž
- Rastové vlastnosti
- Adhézia a suspenzia
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Morfológia
- Myoblastom podobné
- Typ bunky
- Megakaryoblast
04Identifikátory
- Citácia
- MEG-01 (katalógové číslo Cytion 300482)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0425
05Prejav a náchylnosť
- Expresia antigénu
- CD41 +, CD61 +, CDw14 +
06Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10 % FBS
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
08Darca
- Vek darcu
- 55 rokov
- Etnická príslušnosť
- Východná Ázia
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno