Prejsť na obsah
MEG-01
Tkanivo
Kostná dreň
Choroba
Chronická myeloidná leukémia
Synonymá
Meg-01, MEG01, Meg01

Dokumenty

MEG-01

Cell line · Číslo výrobku 300482

The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia MEG-01 je ľudská megakaryoblastová bunková línia vytvorená z kostnej drene 55-ročného muža, ktorý bol vo fáze megakaryoblastickej krízy chronickej myelogénnej leukémie (CML). Táto bunková línia bola vyvinutá v roku 1983 na Nagoya University School of Medicine v Japonsku. Pacient, od ktorého bola MEG-01 odvodená, bol pozitívny na chromozóm Philadelphia (Ph1), ktorý je charakteristickým znakom CML. Bunky MEG-01 vykazujú hyperdiploidný karyotyp s modálnym počtom chromozómov 56 až 58, pričom dôsledne vykazujú prítomnosť chromozómu Ph1, ktorý je výsledkom chromozomálnej translokácie t(9;22).

Bunky MEG-01 majú zmiešané rastové vlastnosti a v kultúre vykazujú adherentné aj suspenzné charakteristiky. Tieto bunky exprimujú niekoľko markerov a antigénov charakteristických pre megakaryocytovú líniu vrátane CD41, CD61 a CDw14. Sú tiež pozitívne na cytoplazmatický faktor VIII, povrchové GPIIb/IIIa a rôzne enzymatické aktivity, ako je periodická kyslá Schiffova reakcia (PAS), alfa-naftylacetátesteráza a kyslá fosfatáza. Zaujímavé je, že bunky MEG-01 sú negatívne na myeloperoxidázu, alfa naftylbutyrát esterázu, naftol AS-D chloroacetát esterázu a alkalickú fosfatázu, čo ich pomáha odlíšiť od iných myeloidných buniek.

MEG-01 je cenným modelom na štúdium ľudskej megakaryopoézy, produkcie krvných doštičiek a biosyntézy proteínov jedinečných pre megakaryocytovú líniu, ako je rastový faktor odvodený od krvných doštičiek (PDGF) a glykoproteíny ako GPIIb/IIIa. Vďaka dobre charakterizovanému genetickému pozadiu a schopnosti exprimovať kľúčové megakaryocytárne markery slúži MEG-01 ako významný nástroj pri skúmaní mechanizmov leukémie a biogenézy trombocytov, hoci nie je určený na terapeutické alebo in vivo aplikácie.

Tkanivo
Kostná dreň
Choroba
Chronická myeloidná leukémia
Synonymá
  • Meg-01
  • MEG01
  • Meg01

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Adhézia a suspenzia
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Myoblastom podobné
Typ bunky
Megakaryoblast

04Identifikátory

Citácia
MEG-01 (katalógové číslo Cytion 300482)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0425

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
CD41 +, CD61 +, CDw14 +

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
55 rokov
Etnická príslušnosť
Východná Ázia