MEG-01
Cell line · Nomor produk 300482
The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...
Penyesuaian / Rekomendasi
- MEG-01Cell line€430.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
Lini sel MEG-01 adalah lini sel megakarioblas manusia yang dibuat dari sumsum tulang pasien pria berusia 55 tahun yang berada dalam fase krisis megakarioblastik Leukemia Myelogenous Kronis (CML). Lini sel ini dikembangkan pada tahun 1983 di Fakultas Kedokteran Universitas Nagoya, Jepang. Pasien yang menjadi sumber MEG-01 positif memiliki kromosom Philadelphia (Ph1), yang merupakan ciri khas CML. Sel MEG-01 menunjukkan kariotipe hiperdiploid dengan jumlah kromosom modal 56 hingga 58, yang secara konsisten menunjukkan keberadaan kromosom Ph1, yang merupakan hasil dari translokasi kromosom t(9;22).
Sel MEG-01 memiliki sifat pertumbuhan campuran, menunjukkan karakteristik melekat dan suspensi dalam kultur. Sel-sel ini mengekspresikan beberapa penanda dan antigen yang merupakan ciri khas garis keturunan megakariosit, termasuk CD41, CD61, dan CDw14. Mereka juga positif untuk Faktor VIII sitoplasma, permukaan GPIIb / IIIa, dan berbagai aktivitas enzimatik seperti reaksi periodic acid-Schiff (PAS), alfa naftil asetat esterase, dan asam fosfatase. Menariknya, sel MEG-01 negatif untuk mieloperoksidase, alfa naftil butirat esterase, naftol AS-D kloroasetat esterase, dan fosfatase basa, yang membantu membedakannya dari sel mieloid lainnya.
MEG-01 telah menjadi model yang berharga untuk mempelajari megakariopoiesis manusia, produksi trombosit, dan biosintesis protein yang unik untuk garis keturunan megakariosit, seperti faktor pertumbuhan yang diturunkan dari trombosit (PDGF) dan glikoprotein seperti GPIIb / IIIa. Karena latar belakang genetiknya yang terkarakterisasi dengan baik dan kemampuannya untuk mengekspresikan penanda megakariosit utama, MEG-01 berfungsi sebagai alat yang signifikan dalam penyelidikan leukemia dan mekanisme biogenesis trombosit, meskipun tidak dimaksudkan untuk aplikasi terapeutik atau in vivo.
- Tisu
- Sumsum tulang
- Penyakit
- Leukemia myeloid kronis
- Sinonim
- Meg-01
- MEG01
- Meg01
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Laki-laki
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Adhesi dan suspensi
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti myoblast
- Jenis sel
- Megakaryoblast
04Pengidentifikasi
- Referensi
- MEG-01 (Nomor katalog Cytion 300482)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0425
05Ekspresi dan kerentanan
- Ekspresi antigen
- CD41 +, CD61 +, CDw14 +
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Tambahkan media dengan 10% FBS
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Kumpulkan sel suspensi dalam tabung 15 ml dan cuci sel yang melekat dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium (gunakan 3-5 ml untuk labu T25 dan 5-10 ml untuk labu T75). Oleskan Accutase (1-2 ml untuk labu T25, 2,5 ml untuk labu T75) untuk memastikan cakupan penuh lapisan sel. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 10 menit. Setelah inkubasi, gabungkan dan sentrifugasi suspensi dan sel yang melekat. Setelah sentrifugasi, resuspensi pelet sel dengan hati-hati dan pindahkan suspensi sel ke dalam labu baru yang berisi medium segar.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- 55 tahun
- Etnis
- Asia Timur
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya
