MEG-01

A linhagem celular MEG-01 é uma linhagem de megacarioblastos humanos estabelecida a partir da medula óssea de um paciente do sexo masculino de 55 anos que se encontrava na fase de crise megacarioblástica da leucemia mielóide crônica (LMC). Essa linha celular foi desenvolvida em 1983 na Faculdade de Medicina da Universidade de Nagoya, no Japão. O paciente do qual a MEG-01 foi derivada apresentava o cromossomo Filadélfia (Ph1), uma característica marcante da LMC. As células MEG-01 apresentam um cariótipo hiperdiplóide com um número modal de cromossomos de 56 a 58, demonstrando consistentemente a presença do cromossomo Ph1, que é resultado da translocação cromossômica t(9;22).

As células MEG-01 apresentam propriedades de crescimento mistas, demonstrando características tanto de adesão quanto de suspensão em cultura. Essas células expressam vários marcadores e antígenos característicos da linhagem megacariocítica, incluindo CD41, CD61 e CDw14. Elas também apresentam resultados positivos para o fator VIII citoplasmático, GPIIb/IIIa de superfície e várias atividades enzimáticas, como a reação de ácido periódico de Schiff (PAS), a alfa-naftilacetatoesterase e a fosfatase ácida. Curiosamente, as células MEG-01 apresentam resultados negativos para mieloperoxidase, alfa-naftilbutiratoesterase, naftol AS-D cloroacetatoesterase e fosfatase alcalina, o que ajuda a distingui-las de outras células mieloides.

O MEG-01 tem sido um modelo valioso para o estudo da megacariopoiese humana, da produção de plaquetas e da biossíntese de proteínas exclusivas da linhagem megacariocítica, como o fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) e glicoproteínas como a GPIIb/IIIa. Devido ao seu background genético bem caracterizado e à sua capacidade de expressar marcadores-chave dos megacariócitos, o MEG-01 serve como uma ferramenta significativa na investigação dos mecanismos da leucemia e da biogênese plaquetária, embora não se destine a aplicações terapêuticas ou in vivo.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.