MEG-01

Linia komórkowa MEG-01 to ludzka linia komórek megakarioblastów utworzona ze szpiku kostnego 55-letniego pacjenta, który znajdował się w fazie kryzysu megakarioblastycznego przewlekłej białaczki szpikowej (CML). Ta linia komórkowa została opracowana w 1983 roku w Nagoya University School of Medicine w Japonii. Pacjent, od którego uzyskano MEG-01, miał dodatni chromosom Philadelphia (Ph1), cechę charakterystyczną CML. Komórki MEG-01 wykazują hiperdiploidalny kariotyp z modalną liczbą chromosomów od 56 do 58, konsekwentnie wykazując obecność chromosomu Ph1, który jest wynikiem translokacji chromosomalnej t(9;22).

Komórki MEG-01 mają mieszane właściwości wzrostu, wykazując zarówno cechy przylegania, jak i zawiesiny w hodowli. Komórki te wykazują ekspresję kilku markerów i antygenów charakterystycznych dla linii megakariocytów, w tym CD41, CD61 i CDw14. Wykazują również pozytywny wynik testu na obecność cytoplazmatycznego czynnika VIII, powierzchniowej GPIIb/IIIa i różnych aktywności enzymatycznych, takich jak okresowa reakcja kwas-Schiff (PAS), esteraza alfa-naftylooctanowa i kwaśna fosfataza. Co ciekawe, komórki MEG-01 są ujemne pod względem mieloperoksydazy, esterazy maślanu alfa-naftylu, esterazy chlorooctanu naftylu AS-D i fosfatazy alkalicznej, co pomaga odróżnić je od innych komórek mieloidalnych.

MEG-01 był cennym modelem do badania ludzkiej megakariopoezy, produkcji płytek krwi i biosyntezy białek unikalnych dla linii megakariocytowej, takich jak płytkowy czynnik wzrostu (PDGF) i glikoproteiny, takie jak GPIIb/IIIa. Ze względu na dobrze scharakteryzowane podłoże genetyczne i zdolność do ekspresji kluczowych markerów megakariocytów, MEG-01 służy jako istotne narzędzie w badaniu białaczki i mechanizmów biogenezy płytek krwi, choć nie jest przeznaczony do zastosowań terapeutycznych ani in vivo.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym