Премини към съдържанието
MEG-01
Тъкан
Костен мозък
Заболяване
Хронична миелоидна левкемия
Синоними
Meg-01, MEG01, Meg01

Документи

MEG-01

Cell line · Номер на продукта 300482

The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия MEG-01 е човешка мегакариобластна клетъчна линия, създадена от костния мозък на 55-годишен пациент от мъжки пол, който е бил във фаза на мегакариобластна криза при хронична миелогенна левкемия (ХМЛ). Тази клетъчна линия е разработена през 1983 г. в Медицинския факултет на Университета в Нагоя, Япония. Пациентът, от когото е получена MEG-01, е положителен за Филаделфийската хромозома (Ph1), отличителен белег на CML. Клетките MEG-01 показват хипердиплоиден кариотип с модален брой хромозоми от 56 до 58, като постоянно показват наличието на Ph1 хромозома, която е резултат от хромозомна транслокация t(9;22).

Клетките MEG-01 имат смесени свойства на растеж, като демонстрират както адхезивни, така и суспензионни характеристики в културата. Тези клетки експресират няколко маркера и антигени, характерни за мегакариоцитната линия, включително CD41, CD61 и CDw14. Те също така са положителни за цитоплазмен фактор VIII, повърхностни GPIIb/IIIa и различни ензимни активности, като реакция на периодична киселина на Schiff (PAS), алфа-нафтилацетат естераза и киселинна фосфатаза. Интересно е, че клетките MEG-01 са отрицателни за миелопероксидаза, алфа-нафтилбутират естераза, нафтол AS-D хлорацетатна естераза и алкална фосфатаза, което спомага за разграничаването им от други миелоидни клетки.

MEG-01 е ценен модел за изучаване на човешката мегакариопоеза, производството на тромбоцити и биосинтезата на протеини, уникални за мегакариоцитната линия, като тромбоцитен растежен фактор (PDGF) и гликопротеини като GPIIb/IIIa. Благодарение на добре характеризирания си генетичен фон и способността си да експресира ключови мегакариоцитни маркери, MEG-01 служи като важен инструмент за изследване на механизмите на левкемията и биогенезата на тромбоцитите, въпреки че не е предназначен за терапевтични или in vivo приложения.

Тъкан
Костен мозък
Заболяване
Хронична миелоидна левкемия
Синоними
  • Meg-01
  • MEG01
  • Meg01

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Адхезивен и суспензионен
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на миобласти
Тип клетка
Мегакариобласт

04Идентификатори

Източник
MEG-01 (каталожен номер 300482 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0425

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
CD41 +, CD61 +, CDw14 +

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Съберете суспендираните клетки в 15-милилитрова епруветка и внимателно промийте прилепналите клетки с PBS без калций и магнезий (използвайте 3-5 ml за колби Т25 и 5-10 ml за колби Т75). Нанесете Accutase (1-2 ml за колби T25 и 2,5 ml за колби T75), като се уверите, че покрива изцяло клетъчния слой. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 10 минути. След инкубацията комбинирайте и центрофугирайте суспензията и адхезивните клетки. След центрофугирането внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета и прехвърлете клетъчната суспензия в нови колби, съдържащи свежа среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
55 години
Етническа принадлежност
Източна Азия