MEG-01

MEG-01 rakuliin on inimese megakarüoblastide rakuliin, mis on loodud 55-aastase meessoost patsiendi luuüdist, kes oli kroonilise müelogeense leukeemia (CML) megakarüoblastilise kriisi faasis. See rakuliin töötati välja 1983. aastal Nagoya ülikooli meditsiinikooli juures Jaapanis. Patsient, kellelt MEG-01 saadi, oli positiivne Philadelphia kromosoomi (Ph1) suhtes, mis on CML-i tunnusmärk. MEG-01 rakkudel on hüperdiploidne karüotüüp, mille modaalne kromosoomide arv on 56-58, mis näitab järjekindlalt Ph1 kromosoomi olemasolu, mis on t(9;22) kromosoomi translokatsiooni tulemus.

MEG-01 rakkudel on segatud kasvueelised, näidates kultuuris nii kleepuvaid kui ka suspensioonilisi omadusi. Need rakud ekspresseerivad mitmeid megakarüotsüütide liinile iseloomulikke markereid ja antigeene, sealhulgas CD41, CD61 ja CDw14. Nad on positiivsed ka VIII tsütoplasmafaktori, GPIIb/IIIa pinna ja erinevate ensüümide, nagu perioodilise happe-Schiffi reaktsioon (PAS), alfa-naftüülatsetaatsteraas ja happeline fosfataas, suhtes. Huvitaval kombel on MEG-01 rakud negatiivsed müeloperoksidaasi, alfa-naftüülbutüraatesteraasi, naftool-AS-D-kloroatsetaatesteraasi ja aluselise fosfataasi suhtes, mis aitab neid teistest müeloidrakkudest eristada.

MEG-01 on olnud väärtuslik mudel inimese megakaryopoeesia, trombotsüütide tootmise ja selliste megakaryotsüütidele omaste valkude, nagu trombotsüütide kasvufaktor (PDGF) ja sellised glükoproteiinid nagu GPIIb/IIIa, biosünteesi uurimiseks. Tänu oma hästi iseloomustatud geneetilisele taustale ja võimele ekspresseerida peamisi megakarüotsüütide markereid, on MEG-01 oluline vahend leukeemia ja trombotsüütide biogeneesi mehhanismide uurimisel, kuigi see ei ole mõeldud terapeutiliseks või in vivo kasutamiseks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest