Перейти до вмісту
MEG-01
Тканина
Кістковий мозок
Хвороба
Хронічна мієлоїдна лейкемія
Синоніми
Meg-01, MEG01, Meg01

Документи

MEG-01

Cell line · Номер товару 300482

The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія MEG-01 - це лінія мегакаріобластів людини, отримана з кісткового мозку 55-річного пацієнта, який перебував у фазі мегакаріобластного кризу хронічної мієлогенної лейкемії (ХМЛ). Ця клітинна лінія була розроблена в 1983 році в Медичній школі Університету Нагої, Японія. Пацієнт, від якого було отримано MEG-01, мав позитивний результат на філадельфійську хромосому (Ph1), що є характерною ознакою ХМЛ. Клітини MEG-01 мають гіперплоїдний каріотип з модальним числом хромосом від 56 до 58, постійно демонструючи присутність хромосоми Ph1, яка є результатом хромосомної транслокації t(9;22).

Клітини MEG-01 мають змішані властивості росту, демонструючи як адгезивні, так і суспензійні характеристики в культурі. Ці клітини експресують декілька маркерів та антигенів, характерних для мегакаріоцитарної лінії, включаючи CD41, CD61 та CDw14. Вони також позитивно реагують на цитоплазматичний фактор VIII, поверхневий GPIIb/IIIa та різні ферментативні активності, такі як періодична реакція кислоти Шиффа (PAS), альфа-нафтилацетат-естераза та кисла фосфатаза. Цікаво, що клітини МЕГ-01 є негативними до мієлопероксидази, альфа-нафтилбутират-естерази, нафтол AS-D хлороацетат-естерази та лужної фосфатази, що допомагає відрізнити їх від інших мієлоїдних клітин.

MEG-01 є цінною моделлю для вивчення мегакаріопоезу людини, виробництва тромбоцитів і біосинтезу білків, унікальних для мегакаріоцитарної лінії, таких як тромбоцитарний фактор росту (PDGF) і глікопротеїни, такі як GPIIb/IIIa. Завдяки своєму добре охарактеризованому генетичному фону та здатності експресувати ключові маркери мегакаріоцитів, MEG-01 слугує важливим інструментом у дослідженні лейкемії та механізмів біогенезу тромбоцитів, хоча він не призначений для терапевтичного або in vivo застосування.

Тканина
Кістковий мозок
Хвороба
Хронічна мієлоїдна лейкемія
Синоніми
  • Meg-01
  • MEG01
  • Meg01

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Адгезійний та суспензійний
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Міобластоподібні
Тип клітини
Мегакаріобласт

04Ідентифікатори

Посилання
MEG-01 (номер за каталогом Cytion 300482)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0425

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
CD41+, CD61+, CDw14+

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Зберіть суспензію клітин у пробірку на 15 мл і обережно відмийте прилиплі клітини PBS, що не містить кальцію і магнію (використовуйте 3-5 мл для колб T25 і 5-10 мл для колб T75). Нанесіть аккутазу (1-2 мл для колб Т25, 2,5 мл для колб Т75), забезпечуючи повне покриття клітинного шару. Інкубуйте клітини при кімнатній температурі протягом 10 хвилин. Після інкубації об'єднайте і центрифугуйте суспензію і прилиплі клітини. Після центрифугування обережно ресуспендуйте клітинну гранулу і перенесіть клітинну суспензію в нові колби зі свіжим середовищем.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
55 років
Етнічна приналежність
Східна Азія