Gå direkt till innehållet
MEG-01
Vävnad
Benmärg
Sjukdom
Kronisk myeloisk leukemi
Synonymer
Meg-01, MEG01, Meg01

MEG-01

Cell line · Produktnummer 300482

The MEG-01 cell line is a human megakaryoblast cell line established from the bone marrow of a 55-year-old male patient who was in the megakaryoblastic cr...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

MEG-01-cellinjen är en human megakaryoblastcellinje som etablerats från benmärgen hos en 55-årig manlig patient som befann sig i den megakaryoblastiska krisfasen av kronisk myeloisk leukemi (KML). Denna cellinje utvecklades 1983 vid Nagoya University School of Medicine i Japan. Den patient som MEG-01 härstammar från var positiv för Philadelphiakromosomen (Ph1), ett kännetecken för KML. MEG-01-cellerna uppvisar en hyperdiploid karyotyp med ett modalt kromosomantal på 56 till 58, vilket konsekvent visar förekomsten av Ph1-kromosomen, som är ett resultat av den kromosomala translokationen t(9;22).

MEG-01-cellerna har blandade tillväxtegenskaper och uppvisar både vidhäftande och suspenderade egenskaper i odling. Dessa celler uttrycker flera markörer och antigener som är karakteristiska för den megakaryocytiska linjen, inklusive CD41, CD61 och CDw14. De testar också positivt för cytoplasmisk faktor VIII, yt-GPIIb/IIIa och olika enzymatiska aktiviteter som PAS-reaktion (Periodic Acid-Schiff), alfanaftylacetatesteras och surt fosfatas. Intressant nog är MEG-01-cellerna negativa för myeloperoxidas, alfanaftylbutyratesteras, naftol AS-D kloracetatesteras och alkaliskt fosfatas, vilket bidrar till att skilja dem från andra myeloida celler.

MEG-01 har varit en värdefull modell för studier av megakaryopoes, trombocytproduktion och biosyntesen av proteiner som är unika för den megakaryocytiska linjen, t.ex. trombocytderiverad tillväxtfaktor (PDGF) och glykoproteiner som GPIIb/IIIa. På grund av sin väl karakteriserade genetiska bakgrund och sin förmåga att uttrycka viktiga megakaryocytmarkörer är MEG-01 ett viktigt verktyg för att undersöka mekanismerna bakom leukemi och trombocytbiogenes, även om den inte är avsedd för terapeutiska eller in vivo-tillämpningar.

Vävnad
Benmärg
Sjukdom
Kronisk myeloisk leukemi
Synonymer
  • Meg-01
  • MEG01
  • Meg01

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Adhärens och suspension
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Myoblastliknande
Celltyp
Megakaryoblast

04Identifierare

Källa
MEG-01 (Cytion katalognummer 300482)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0425

05Uttryck och mottaglighet

Antigenuttryck
CD41 +, CD61 +, CDw14 +

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Samla de suspenderade cellerna i ett 15 ml rör och tvätta försiktigt de vidhäftande cellerna med PBS utan kalcium och magnesium (använd 3-5 ml för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar). Applicera Accutase (1-2 ml för T25-kolvar, 2,5 ml för T75-kolvar) och se till att cellskiktet täcks helt. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 10 minuter. Efter inkubationen, kombinera och centrifugera både suspensionen och de vidhäftande cellerna. Efter centrifugering, resuspendera försiktigt cellpelleten och överför cellsuspensionen till nya kolvar med nytt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
55 år
Etnicitet
Östasien