MLE-12

MLE-12 est une lignée cellulaire épithéliale pulmonaire murine établie à partir de l'épithélium respiratoire distal à l'aide de souris transgéniques exprimant le grand antigène tumoral du virus simien 40 (SV40) sous le contrôle du promoteur de la protéine humaine du surfactant C (SP-C). Cette lignée cellulaire se caractérise par sa capacité à maintenir certaines propriétés des cellules alvéolaires de type II, telles que l'expression des protéines du surfactant SP-B et SP-C, qui sont cruciales pour la synthèse du surfactant pulmonaire et la fonction pulmonaire. Les cellules MLE-12 présentent également des caractéristiques morphologiques clés des cellules alvéolaires de type II, notamment des microvillosités et des corps multivésiculaires, bien qu'elles manquent de certaines caractéristiques comme les corps lamellaires dans les passages ultérieurs.

La lignée cellulaire MLE-12 est largement utilisée pour étudier la régulation et la sécrétion des protéines du surfactant, ainsi que les réponses pulmonaires aux stimuli. Elle sécrète des phospholipides en réponse à divers sécrétagogues tels que l'ATP et les esters de phorbol, reproduisant ainsi certains aspects de la fonction des cellules alvéolaires de type II. Alors que cette sécrétion est robuste dans les premiers passages, elle diminue dans les passages ultérieurs, parallèlement à des changements dans les réponses médiées par les récepteurs. Ce modèle est particulièrement utile pour explorer les mécanismes qui sous-tendent les syndromes de détresse respiratoire et les déficiences en surfactant. En outre, la lignée cellulaire permet de mieux comprendre la carcinogenèse pulmonaire, étant donné qu'elle est dérivée d'une tumorigenèse induite par le SV40.

Les cellules MLE-12 servent d'outil pour élucider les voies de transformation des protéines du surfactant et tester des stratégies thérapeutiques pour le remplacement du surfactant. Leur maintien de l'expression du SP-C, un marqueur spécifique de l'épithélium alvéolaire, en fait un modèle in vitro pertinent pour l'étude des processus et des maladies spécifiques du poumon.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie