MLE-12

MLE-12 es una línea celular epitelial pulmonar murina establecida a partir de epitelio respiratorio distal mediante ratones transgénicos que expresan el antígeno tumoral grande del virus simio 40 (SV40) bajo el control del promotor de la proteína surfactante C (SP-C) humana. Esta línea celular se caracteriza por su capacidad para mantener ciertas propiedades de las células alveolares de tipo II, como la expresión de las proteínas surfactantes SP-B y SP-C, cruciales para la síntesis de surfactante pulmonar y la función pulmonar. Las células MLE-12 también muestran características morfológicas clave de las células alveolares de tipo II, como microvellosidades y cuerpos multivesiculares, aunque carecen de algunas características como los cuerpos laminares en pasajes posteriores.

La línea celular MLE-12 se utiliza ampliamente para estudiar la regulación de la proteína surfactante, la secreción y las respuestas pulmonares a estímulos. Segrega fosfolípidos en respuesta a diversos secretagogos como el ATP y los ésteres de forbol, imitando aspectos de la función de las células alveolares de tipo II. Si bien esta secreción es robusta en los primeros pasajes, disminuye en pasajes posteriores, junto con cambios en las respuestas mediadas por receptores. Este modelo es especialmente valioso para explorar los mecanismos subyacentes a los síndromes de dificultad respiratoria y las deficiencias de surfactante. Además, la línea celular ofrece información sobre la carcinogénesis pulmonar, dada su derivación de la tumorigénesis impulsada por SV40.

Las células MLE-12 sirven como herramienta para dilucidar las vías de procesamiento de la proteína surfactante y probar estrategias terapéuticas para la sustitución del surfactante. Su mantenimiento de la expresión de SP-C, un marcador específico del epitelio alveolar, las convierte en un modelo in vitro relevante para investigar procesos y enfermedades específicos del pulmón.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía