MLE-12

Η MLE-12 είναι μια κυτταρική σειρά πνευμονικών επιθηλιακών κυττάρων ποντικού που δημιουργήθηκε από το απομακρυσμένο αναπνευστικό επιθήλιο με τη χρήση διαγονιδιακών ποντικών που εκφράζουν το μεγάλο αντιγόνο όγκου του ιού των πιθήκων 40 (SV40) υπό τον έλεγχο του υποκινητή της ανθρώπινης επιφανειοδραστικής πρωτεΐνης C (SP-C). Αυτή η κυτταρική σειρά χαρακτηρίζεται από την ικανότητά της να διατηρεί ορισμένες ιδιότητες κυψελιδικών κυττάρων τύπου ΙΙ, όπως η έκφραση των επιφανειοδραστικών πρωτεϊνών SP-B και SP-C, οι οποίες είναι ζωτικής σημασίας για τη σύνθεση του πνευμονικού επιφανειοδραστικού και την πνευμονική λειτουργία. Τα κύτταρα MLE-12 εμφανίζουν επίσης βασικά μορφολογικά χαρακτηριστικά κυψελιδικών κυττάρων τύπου ΙΙ, συμπεριλαμβανομένων των μικροβελόνων και των πολυκυψελιδικών σωμάτων, αν και στερούνται ορισμένων χαρακτηριστικών όπως τα ελασματοειδή σώματα σε μεταγενέστερα περάσματα.

Η κυτταρική σειρά MLE-12 χρησιμοποιείται ευρέως για τη μελέτη της ρύθμισης της επιφανειοδραστικής πρωτεΐνης, της έκκρισης και των πνευμονικών αποκρίσεων σε ερεθίσματα. Εκκρίνει φωσφολιπίδια σε απόκριση σε διάφορους εκκριματογόνους παράγοντες, όπως ATP και εστέρες φορβόλης, μιμούμενη πτυχές της λειτουργίας κυψελιδικών κυττάρων τύπου ΙΙ. Ενώ αυτή η έκκριση είναι ισχυρή στα πρώτα περάσματα, μειώνεται στα μεταγενέστερα περάσματα, μαζί με αλλαγές στις αποκρίσεις που διαμεσολαβούνται από υποδοχείς. Αυτό το μοντέλο είναι ιδιαίτερα πολύτιμο για τη διερεύνηση των μηχανισμών που διέπουν τα σύνδρομα αναπνευστικής δυσχέρειας και τις ανεπάρκειες επιφανειοδραστικής ουσίας. Επιπλέον, η κυτταρική σειρά προσφέρει γνώσεις σχετικά με την πνευμονική καρκινογένεση, δεδομένης της προέλευσής της από την καρκινογένεση με βάση το SV40.

Τα κύτταρα MLE-12 χρησιμεύουν ως εργαλείο για τη διαλεύκανση των μονοπατιών επεξεργασίας της επιφανειοδραστικής πρωτεΐνης και τη δοκιμή θεραπευτικών στρατηγικών για την αντικατάσταση της επιφανειοδραστικής ουσίας. Η διατήρηση της έκφρασης του SP-C, ενός δείκτη ειδικού για το κυψελιδικό επιθήλιο, τα καθιστά ένα σχετικό in vitro μοντέλο για τη διερεύνηση διεργασιών και ασθενειών που σχετίζονται με τον πνεύμονα.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης