MLE-12

MLE-12 è una linea cellulare epiteliale polmonare murina ottenuta dall'epitelio respiratorio distale di topi transgenici che esprimono il grande antigene tumorale del virus simiano 40 (SV40) sotto il controllo del promotore della proteina surfattante C (SP-C) umana. Questa linea cellulare è caratterizzata dalla capacità di mantenere alcune proprietà delle cellule alveolari di tipo II, come l'espressione delle proteine surfattanti SP-B e SP-C, fondamentali per la sintesi del surfattante polmonare e la funzione polmonare. Le cellule MLE-12 mostrano anche caratteristiche morfologiche chiave delle cellule alveolari di tipo II, tra cui microvilli e corpi multivescicolari, anche se mancano alcune caratteristiche come i corpi lamellari nei passaggi successivi.

La linea cellulare MLE-12 è ampiamente utilizzata per studiare la regolazione delle proteine del surfattante, la secrezione e le risposte polmonari agli stimoli. Secerne fosfolipidi in risposta a vari secretagoghi come ATP e esteri di forbolo, imitando gli aspetti della funzione delle cellule alveolari di tipo II. Mentre questa secrezione è robusta nei primi passaggi, diminuisce nei passaggi successivi, insieme a cambiamenti nelle risposte mediate dai recettori. Questo modello è particolarmente prezioso per esplorare i meccanismi alla base delle sindromi da distress respiratorio e delle carenze di surfattante. Inoltre, la linea cellulare offre spunti di riflessione sulla carcinogenesi polmonare, data la sua derivazione dalla tumorigenesi guidata da SV40.

Le cellule MLE-12 sono uno strumento per chiarire le vie di elaborazione delle proteine del surfattante e per testare strategie terapeutiche per la sostituzione del surfattante. Il mantenimento dell'espressione di SP-C, un marcatore specifico dell'epitelio alveolare, le rende un modello in vitro importante per studiare processi e malattie specifici del polmone.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia