MLE-12

MLE-12 är en murin lungepitelcellinje som etablerats från distalt respiratoriskt epitel med hjälp av transgena möss som uttrycker SV40 (simian virus 40) stort tumörantigen under kontroll av SP-C (human surfactant protein C)-promotorn. Denna cellinje kännetecknas av sin förmåga att bibehålla vissa egenskaper hos alveolära typ II-celler, såsom uttryck av surfaktantproteinerna SP-B och SP-C, vilka är avgörande för syntesen av lungsurfaktant och lungfunktionen. MLE-12-celler uppvisar också viktiga morfologiska egenskaper hos alveolära typ II-celler, inklusive mikrovilli och multivesikulära kroppar, även om de saknar vissa egenskaper som lamellära kroppar i senare passager.

MLE-12-cellinjen används ofta för att studera reglering och utsöndring av surfaktantprotein samt lungornas reaktion på stimuli. Den utsöndrar fosfolipider som svar på olika sekretagoger som ATP och phorbolestrar, vilket efterliknar aspekter av typ II alveolär cellfunktion. Denna utsöndring är kraftig under tidiga passager, men minskar under senare passager, tillsammans med förändringar i receptormedierade svar. Denna modell är särskilt värdefull för att utforska mekanismer som ligger bakom andningsbesvärssyndrom och brist på surfaktant. Dessutom ger cellinjen insikter i lungcancerogenes, eftersom den härstammar från SV40-driven tumörigenes.

MLE-12-celler fungerar som ett verktyg för att klarlägga processvägarna för surfaktantprotein och testa terapeutiska strategier för att ersätta surfaktant. Deras bibehållande av SP-C-uttryck, en markör som är specifik för det alveolära epitelet, gör dem till en relevant in vitro-modell för att undersöka lungspecifika processer och sjukdomar.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring