MLE-12

MLE-12 er en murin lungeepitelcellelinje etableret fra distalt respiratorisk epitel ved hjælp af transgene mus, der udtrykker simian virus 40 (SV40) stort tumorantigen under kontrol af den humane surfactant protein C (SP-C)-promotor. Denne cellelinje er kendetegnet ved sin evne til at opretholde visse egenskaber ved alveolære type II-celler, såsom udtrykket af surfaktantproteinerne SP-B og SP-C, som er afgørende for syntese af lungesurfaktant og lungefunktion. MLE-12-celler udviser også vigtige morfologiske træk ved alveolære type II-celler, herunder mikrovilli og multivesikulære legemer, selv om de mangler nogle træk som lamellære legemer i senere passager.

MLE-12-cellelinjen bruges i vid udstrækning til at studere regulering og udskillelse af overfladeaktive proteiner og lungernes reaktion på stimuli. Den udskiller fosfolipider som reaktion på forskellige sekretagoger som ATP og phorbolestere, hvilket efterligner aspekter af type II-alveolærcellefunktionen. Mens denne udskillelse er robust i de tidlige stadier, aftager den i de senere stadier sammen med ændringer i receptormedierede reaktioner. Denne model er særlig værdifuld til at udforske de mekanismer, der ligger til grund for respiratoriske distress-syndromer og surfactant-mangel. Derudover giver cellelinjen indsigt i lungekarcinogenese, da den stammer fra SV40-drevet tumorigenese.

MLE-12-celler fungerer som et værktøj til at belyse vejene til behandling af overfladeaktivt protein og til at teste terapeutiske strategier til erstatning af overfladeaktivt stof. Deres opretholdelse af SP-C-ekspression, en markør, der er specifik for det alveolære epitel, gør dem til en relevant in vitro-model til undersøgelse af lungespecifikke processer og sygdomme.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring