MLE-12

MLE-12 ir peļu plaušu epitēlija šūnu līnija, kas izveidota no distālā elpceļu epitēlija, izmantojot transgēnas peles, kas ekspresē simpātiskā vīrusa 40 (SV40) lielo audzēja antigēnu, ko kontrolē cilvēka virsmaktanta proteīna C (SP-C) promotors. Šai šūnu līnijai ir raksturīga spēja saglabāt noteiktas II tipa alveolāro šūnu īpašības, piemēram, virsmaktanta proteīnu SP-B un SP-C ekspresiju, kas ir būtiski svarīgi plaušu virsmaktanta sintēzei un plaušu funkcijai. MLE-12 šūnām piemīt arī galvenās II tipa alveolāro šūnu morfoloģiskās pazīmes, tostarp mikrovilas un multivesikulārie ķermeņi, lai gan vēlākajās pasāžās tām trūkst dažu pazīmju, piemēram, lamelāro ķermeņu.

MLE-12 šūnu līniju plaši izmanto, lai pētītu virsmaktanta proteīnu regulāciju, sekrēciju un plaušu reakciju uz stimuliem. Tā izdala fosfolipīdus, reaģējot uz dažādiem sekretagogēniem, piemēram, ATP un fosfora esteriem, tādējādi imitējot II tipa alveolāro šūnu funkcijas aspektus. Lai gan šī sekrēcija ir spēcīga agrīnā stadijā, vēlākajās stadijās tā samazinās, kā arī mainās receptoru mediētās atbildes reakcijas. Šis modelis ir īpaši vērtīgs, lai izpētītu mehānismus, kas ir elpošanas distresa sindromu un virsmaktanta deficīta pamatā. Turklāt šī šūnu līnija piedāvā ieskatu plaušu kancerogēnāzē, ņemot vērā, ka tā ir atvasināta no SV40 izraisītas audzēju veidošanās.

MLE-12 šūnas kalpo kā instruments, lai noskaidrotu virsmaktanta proteīnu apstrādes ceļus un pārbaudītu terapeitiskās stratēģijas virsmaktanta aizstāšanai. To uzturētā SP-C ekspresija, kas ir alveolārajam epitēlijam raksturīgs marķieris, padara tās par piemērotu in vitro modeli plaušu specifisku procesu un slimību izpētei.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu