MLE-12

MLE-12 je linie myších plicních epiteliálních buněk vytvořená z distálního respiračního epitelu pomocí transgenních myší, které exprimují velký nádorový antigen similského viru 40 (SV40) pod kontrolou promotoru lidského surfaktantového proteinu C (SP-C). Tato buněčná linie se vyznačuje schopností zachovat si určité vlastnosti alveolárních buněk typu II, jako je exprese surfaktantových proteinů SP-B a SP-C, které jsou klíčové pro syntézu plicního surfaktantu a funkci plic. Buňky MLE-12 rovněž vykazují klíčové morfologické znaky alveolárních buněk typu II, včetně mikrovilů a multivesikulárních tělísek, ačkoli v pozdějších pasážích postrádají některé znaky, jako jsou lamelární tělíska.

Buněčná linie MLE-12 se široce používá ke studiu regulace surfaktantových proteinů, sekrece a plicních reakcí na podněty. Vylučuje fosfolipidy v reakci na různé sekretagogy, jako je ATP a estery fosforu, čímž napodobuje aspekty funkce alveolárních buněk typu II. Zatímco tato sekrece je silná v časných fázích, v pozdějších fázích se snižuje spolu se změnami v reakcích zprostředkovaných receptory. Tento model je zvláště cenný pro zkoumání mechanismů, které jsou základem syndromů respirační tísně a nedostatku surfaktantu. Kromě toho tato buněčná linie nabízí poznatky o plicní karcinogenezi vzhledem k tomu, že je odvozena od nádorového bujení způsobeného SV40.

Buňky MLE-12 slouží jako nástroj pro objasnění cest zpracování proteinů surfaktantu a testování terapeutických strategií pro náhradu surfaktantu. Díky udržování exprese SP-C, markeru specifického pro alveolární epitel, jsou vhodným in vitro modelem pro zkoumání procesů a onemocnění specifických pro plíce.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení