MLE-12

MLE-12は、ヒトサーファクタントタンパク質C（SP-C）プロモーターの制御下でシミアンウイルス40（SV40）大腫瘍抗原を発現するトランスジェニックマウスを用いて、遠位呼吸器上皮から樹立されたマウス肺上皮細胞株である。この細胞株は、肺胞II型細胞の特定の性質、例えば肺サーファクタント合成と肺機能に重要なサーファクタントタンパク質SP-BとSP-Cの発現を維持する能力を持つことが特徴である。MLE-12細胞はまた、肺胞II型細胞の主要な形態学的特徴である微絨毛や多胞体を示すが、継代後半になるとラメラ小体のようないくつかの特徴を欠くようになる。

MLE-12細胞株は、サーファクタントタンパク質の制御、分泌、刺激に対する肺反応の研究に広く使われている。MLE-12細胞株は、ATPやホルボールエステルなどの様々な分泌促進剤に反応してリン脂質を分泌し、II型肺胞細胞の機能を模倣する。この分泌は継代初期には強固であるが、継代後期には受容体を介した反応の変化とともに減少する。このモデルは、呼吸困難症候群やサーファクタント欠乏症の根底にある機序を探るのに特に有用である。さらに、この細胞株はSV40による腫瘍形成に由来することから、肺の発癌についての知見を与えてくれる。

MLE-12細胞は、サーファクタントタンパク質プロセシングの経路を解明し、サーファクタント代替の治療戦略をテストするためのツールとして役立っている。肺胞上皮に特異的なマーカーであるSP-Cの発現が維持されていることから、肺に特異的なプロセスや疾患を研究するためのin vitroモデルとして適している。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。