MLE-12

Az MLE-12 egy olyan egér tüdőhámsejtvonal, amelyet a disztális légúti epitéliumból hoztak létre transzgenikus egerek segítségével, amelyek a 40-es simian vírus (SV40) nagy tumorantigént expresszálják a humán surfactant protein C (SP-C) promóterének irányítása alatt. Ezt a sejtvonalat az jellemzi, hogy képes fenntartani az alveoláris II. típusú sejtek bizonyos tulajdonságait, mint például a surfactant fehérjék SP-B és SP-C expresszióját, amelyek döntő fontosságúak a tüdő surfactant szintéziséhez és a tüdőfunkcióhoz. Az MLE-12 sejtek az alveoláris II. típusú sejtek kulcsfontosságú morfológiai jellemzőit is mutatják, beleértve a mikrovillákat és a multivezikuláris testeket, bár a későbbi passzázsokban hiányoznak belőlük bizonyos jellemzők, mint például a lamelláris testek.

Az MLE-12 sejtvonalat széles körben használják a szurfaktáns fehérje szabályozásának, szekréciójának és a tüdő ingerekre adott válaszainak tanulmányozására. Foszfolipideket választ ki különböző szekretagógokra, például ATP-re és forbol-észterekre, utánozva a II. típusú alveoláris sejtek működésének aspektusait. Míg ez a szekréció a korai passzázsokban erőteljes, a későbbi passzázsokban csökken, a receptorok által közvetített válaszok változásaival együtt. Ez a modell különösen értékes a légzési distressz szindrómák és a szurfaktánshiány hátterében álló mechanizmusok feltárására. Ezenkívül a sejtvonal betekintést nyújt a pulmonális karcinogenezisbe is, mivel SV40 által vezérelt tumorigenezisből származik.

Az MLE-12 sejtek eszközként szolgálnak a szurfaktáns fehérje feldolgozásának útvonalainak feltárásához és a szurfaktáns pótlására irányuló terápiás stratégiák teszteléséhez. Az alveoláris epitheliumra specifikus marker, az SP-C expressziójának fenntartása releváns in vitro modellé teszi őket a tüdőspecifikus folyamatok és betegségek vizsgálatára.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban