Skip to content
MLE-12
Tissue
ריאה
Disease
רגיל
Synonyms
MLE 12, MLE12, Murine Lung Epithelial-12

Documents

MLE-12

Cell line · Product number 305314

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

MLE-12 הוא קו תאים אפיתל ריאתי עכברי שהוקם מתאי אפיתל נשימתי דיסטלי באמצעות עכברים טרנסגניים המבטאים את האנטיגן הגדול של נגיף הקוף 40 (SV40) תחת בקרת מקדם החלבון C (SP-C) של חומר פעילי שטח אנושי. קו תאים זה מאופיין ביכולתו לשמור על תכונות מסוימות של תאי אלבולוס מסוג II, כגון ביטוי חלבוני פעילי שטח SP-B ו-SP-C, החיוניים לסינתזת פעילי שטח ריאתיים ולתפקוד הריאות. תאי MLE-12 מציגים גם תכונות מורפולוגיות מרכזיות של תאי אלבולוס מסוג II, כולל מיקרו-וילי וגופים רב-שלפוחיתיים, אם כי הם חסרים תכונות מסוימות כמו גופים למינריים במעברים מאוחרים יותר.

קו התאים MLE-12 נמצא בשימוש נרחב לחקר ויסות חלבוני פעילי שטח, הפרשתם ותגובות ריאתיות לגירויים. הוא מפריש פוספוליפידים בתגובה למגוון חומרים מעוררי הפרשה כגון ATP ואסטרים פורבוליים, ומחקה היבטים של תפקוד תאי אלבולוס מסוג II. הפרשה זו חזקה במעברים מוקדמים, אך פוחתת במעברים מאוחרים יותר, יחד עם שינויים בתגובות המתווכות על ידי קולטנים. מודל זה חשוב במיוחד לחקר המנגנונים העומדים בבסיס תסמונות מצוקה נשימתית ומחסור בחומרים פעילי שטח. בנוסף, קו התאים מספק תובנות לגבי קרצינוגנזה ריאתית, בהתחשב במקורו בגידול המונע על ידי SV40.

תאי MLE-12 משמשים ככלי להבהרת המסלולים של עיבוד חלבון פעילי שטח ולבחינת אסטרטגיות טיפוליות להחלפת פעילי שטח. שמירתם על ביטוי SP-C, סמן ספציפי לאפיתל האלveolar, הופכת אותם למודל רלוונטי in vitro לחקר תהליכים ומחלות ספציפיים לריאות.

Tissue
ריאה
Disease
רגיל
Synonyms
  • MLE 12
  • MLE12
  • Murine Lung Epithelial-12

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine lung epithelial cell line (MLE-12) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via transfection, supporting immortalization of primary lung epithelial cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תא אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים

04Identifiers

Citation
MLE-12 (מספר קטלוגי Cytion 305314)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_3751

05Expression and susceptibility

Protein expression
גנים שבאים לידי ביטוי: חלבוני פעילי שטח ריאתיים B, C (SP-B, SP-C)
Viruses
טרנספורמנט: נגיף סימיאן 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
פעמיים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
FVB/N-Tg(SFTPC-TAg)5.1Jaw טרנסגני
Donor age
5 חודשים

10Product details

Composition table