MLE-12

MLE-12 er en murin lungeepitelcellelinje som er etablert fra distalt respiratorisk epitel ved hjelp av transgene mus som uttrykker det store tumorantigenet fra simian virus 40 (SV40) under kontroll av det humane surfaktantprotein C (SP-C)-promotoren. Denne cellelinjen kjennetegnes ved sin evne til å opprettholde visse egenskaper ved alveolære type II-celler, som for eksempel uttrykket av surfaktantproteinene SP-B og SP-C, som er avgjørende for syntese av surfaktant i lungene og lungefunksjon. MLE-12-celler viser også viktige morfologiske trekk ved alveolære type II-celler, blant annet mikrovilli og multivesikulære legemer, selv om de mangler enkelte trekk som lamellære legemer i senere passasjer.

MLE-12-cellelinjen er mye brukt til å studere regulering av surfaktantproteiner, utskillelse og pulmonal respons på stimuli. Den skiller ut fosfolipider som respons på ulike sekretagoger som ATP og phorbolestere, noe som etterligner aspekter ved type II-alveolære cellers funksjon. Mens denne utskillelsen er robust i de tidlige stadiene, avtar den i senere stadier, sammen med endringer i reseptormedierte responser. Denne modellen er spesielt verdifull når det gjelder å utforske mekanismene som ligger til grunn for luftveissyndromer og mangel på surfaktant. I tillegg gir cellelinjen innsikt i lungekarsinogenese, siden den stammer fra SV40-drevet tumorigenese.

MLE-12-celler er et verktøy for å belyse prosessering av surfaktantproteiner og teste terapeutiske strategier for erstatning av surfaktant. At de opprettholder SP-C-uttrykk, en markør som er spesifikk for det alveolære epitelet, gjør dem til en relevant in vitro-modell for å undersøke lungespesifikke prosesser og sykdommer.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring