MLE-12

MLE-12 is een muizen longepitheelcellijn die is gemaakt van distaal respiratoir epitheel met behulp van transgene muizen die het simian virus 40 (SV40) large tumor antigen tot expressie brengen onder controle van de menselijke surfactant proteïne C (SP-C) promoter. Deze cellijn wordt gekenmerkt door zijn vermogen om bepaalde eigenschappen van alveolaire type II cellen te behouden, zoals de expressie van de surfactant eiwitten SP-B en SP-C, die cruciaal zijn voor de synthese van long surfactant en de longfunctie. MLE-12 cellen vertonen ook belangrijke morfologische kenmerken van alveolaire type II cellen, waaronder microvilli en multivesiculaire lichamen, hoewel ze sommige kenmerken zoals lamellaire lichamen in latere passages missen.

De MLE-12 cellijn wordt veel gebruikt om de regulatie van surfactant eiwitten, secretie en pulmonale reacties op stimuli te bestuderen. Ze scheidt fosfolipiden af in reactie op verschillende secretogen zoals ATP en phorbol esters, waarbij aspecten van de type II alveolaire celfunctie worden nagebootst. Terwijl deze secretie robuust is in vroege passages, vermindert deze in latere passages, samen met veranderingen in receptorgemedieerde reacties. Dit model is met name waardevol voor het onderzoeken van mechanismen die ten grondslag liggen aan respiratoire distress syndromen en surfactant deficiënties. Daarnaast biedt de cellijn inzicht in pulmonale carcinogenese, gezien de afleiding van SV40-gestuurde tumorigenese.

MLE-12 cellen dienen als hulpmiddel voor het ophelderen van de paden van de verwerking van surfactant eiwitten en het testen van therapeutische strategieën voor de vervanging van surfactant. Door het behoud van SP-C expressie, een marker die specifiek is voor het alveolaire epitheel, zijn ze een relevant in vitro model voor het onderzoeken van longspecifieke processen en ziekten.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring