MLE-12

MLE-12 to mysia linia komórek nabłonka płuc utworzona z dystalnego nabłonka oddechowego przy użyciu transgenicznych myszy wyrażających duży antygen nowotworowy wirusa simian virus 40 (SV40) pod kontrolą promotora ludzkiego białka surfaktantu C (SP-C). Ta linia komórkowa charakteryzuje się zdolnością do utrzymywania pewnych właściwości komórek pęcherzykowych typu II, takich jak ekspresja białek surfaktantu SP-B i SP-C, które są kluczowe dla syntezy surfaktantu płucnego i funkcji płuc. Komórki MLE-12 wykazują również kluczowe cechy morfologiczne komórek pęcherzykowych typu II, w tym mikrokosmki i ciałka wielopęcherzykowe, choć w późniejszych pasażach brakuje im niektórych cech, takich jak ciałka blaszkowate.

Linia komórkowa MLE-12 jest szeroko stosowana do badania regulacji białek surfaktantu, wydzielania i odpowiedzi płuc na bodźce. Wydziela fosfolipidy w odpowiedzi na różne czynniki pobudzające wydzielanie, takie jak ATP i estry forbolu, naśladując aspekty funkcji komórek pęcherzykowych typu II. Podczas gdy wydzielanie to jest silne we wczesnych pasażach, zmniejsza się w późniejszych pasażach, wraz ze zmianami w odpowiedziach za pośrednictwem receptorów. Model ten jest szczególnie cenny do badania mechanizmów leżących u podstaw zespołów niewydolności oddechowej i niedoborów surfaktantu. Ponadto linia komórkowa oferuje wgląd w kancerogenezę płucną, biorąc pod uwagę jej pochodzenie z nowotworów wywołanych przez SV40.

Komórki MLE-12 służą jako narzędzie do wyjaśnienia szlaków przetwarzania białka surfaktantu i testowania strategii terapeutycznych w celu zastąpienia surfaktantu. Utrzymanie przez nie ekspresji SP-C, markera specyficznego dla nabłonka pęcherzyków płucnych, czyni je odpowiednim modelem in vitro do badania procesów i chorób specyficznych dla płuc.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym