01General information
- Description
MLE-12 是利用转基因小鼠从远端呼吸道上皮建立的小鼠肺上皮细胞系,它在人表面活性物质蛋白 C (SP-C) 启动子的控制下表达猿病毒 40 (SV40) 大肿瘤抗原。这种细胞系的特点是能保持肺泡 II 型细胞的某些特性,如表达对肺表面活性物质合成和肺功能至关重要的表面活性物质蛋白 SP-B 和 SP-C。MLE-12细胞还显示出肺泡II型细胞的主要形态特征,包括微绒毛和多囊体,但它们在后期传代中缺乏片状体等一些特征。
MLE-12 细胞系被广泛用于研究表面活性物质蛋白的调节、分泌和肺对刺激的反应。它能分泌磷脂以应对 ATP 和植物醇酯等各种分泌物,模拟 II 型肺泡细胞功能的各个方面。这种分泌在早期很旺盛,但在后期随着受体介导的反应的变化而减少。这种模型对于探索呼吸窘迫综合征和表面活性物质缺乏症的机制特别有价值。此外,由于该细胞系来源于 SV40 驱动的肿瘤发生,它还能让人们深入了解肺癌的发生。
MLE-12 细胞是阐明表面活性物质蛋白加工途径和测试表面活性物质替代治疗策略的工具。肺泡上皮特异性标志物 SP-C 的表达保持不变,使其成为研究肺部特异性过程和疾病的相关体外模型。
- Tissue
- 肺部
- Disease
- 正常
- Synonyms
- MLE 12
- MLE12
- Murine Lung Epithelial-12
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine lung epithelial cell line (MLE-12) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via transfection, supporting immortalization of primary lung epithelial cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Cell type
- 上皮细胞
- Tumourigenic
- 是,在裸鼠身上
04Identifiers
- Citation
- MLE-12(Cytion 目录编号 305314)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_3751
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- 表达的基因:肺表面活性蛋白 B、C(SP-B、SP-C)
- Viruses
- 转化体: Simian virus 40 (SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Fluid renewal
- 每周 2 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Breed / subspecies
- FVB/N-Tg(SFTPC-TAg)5.1Jaw 转基因
- Donor age
- 5 个月
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
10Product details
- Composition table
