Pereiti prie turinio
MLE-12
Audinys
Plaučiai
Liga
Normalus
Sinonimai
MLE 12, MLE12, Murine Lung Epithelial-12

Dokumentai

MLE-12

Cell line · Prekės numeris 305314

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MLE-12 yra pelių plaučių epitelio ląstelių linija, sukurta iš distalinio kvėpavimo takų epitelio, naudojant transgeninių pelių, ekspresuojančių didžiojo naviko antigeną, kontroliuojamą žmogaus paviršiaus aktyviojo baltymo C (SP-C) promotoriaus. Šiai ląstelių linijai būdingas gebėjimas išlaikyti tam tikras II tipo alveolinių ląstelių savybes, pavyzdžiui, paviršinio aktyvumo baltymų SP-B ir SP-C, kurie yra labai svarbūs plaučių paviršinio aktyvumo sintezei ir plaučių funkcijai, raišką. MLE-12 ląstelėms taip pat būdingos pagrindinės II tipo alveolinių ląstelių morfologinės savybės, įskaitant mikrovilių ir daugialąsčių kūnelių, nors vėlesniuose etapuose jos neturi kai kurių savybių, pavyzdžiui, plokštelinių kūnelių.

MLE-12 ląstelių linija plačiai naudojama paviršinio aktyvumo baltymo reguliacijai, sekrecijai ir plaučių reakcijai į dirgiklius tirti. Ji išskiria fosfolipidus, reaguodama į įvairius sekretoagus, tokius kaip ATP ir forbolio esteriai, ir taip imituoja II tipo alveolinių ląstelių funkciją. Nors ši sekrecija yra stipri ankstyvosiose stadijose, vėlesnėse stadijose ji mažėja, kartu su receptorių tarpininkaujamų reakcijų pokyčiais. Šis modelis yra ypač vertingas tiriant mechanizmus, kuriais grindžiami kvėpavimo distreso sindromai ir paviršinio aktyvumo medžiagų trūkumas. Be to, ši ląstelių linija suteikia galimybę susipažinti su plaučių kancerogeneze, nes ji yra kilusi iš SV40 sukelto naviko.

MLE-12 ląstelės yra įrankis, padedantis išsiaiškinti paviršinio aktyvumo baltymo perdirbimo kelius ir išbandyti paviršinio aktyvumo baltymo pakeitimo terapines strategijas. Dėl to, kad šios ląstelės išlaiko alveoliniam epiteliui būdingą SP-C raišką, jos yra tinkamas in vitro modelis plaučių specifiniams procesams ir ligoms tirti.

Audinys
Plaučiai
Liga
Normalus
Sinonimai
  • MLE 12
  • MLE12
  • Murine Lung Epithelial-12

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine lung epithelial cell line (MLE-12) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via transfection, supporting immortalization of primary lung epithelial cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelinė ląstelė
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis

04Identifikatoriai

Nuoroda
MLE-12 (Cytion katalogo numeris 305314)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_3751

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Išreikšti genai: plaučių surfaktantiniai baltymai B, C (SP-B, SP-C)
Virusai
Transformantas: Simiano virusas 40 (SV40)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
FVB/N-Tg(SFTPC-TAg)5.1Jaw transgeninis
Donoro amžius
5 mėnesiai

10Produkto aprašymas

Sudėties lentelė