Перейти до вмісту
MLE-12
Тканина
Легені
Хвороба
Нормально
Синоніми
MLE 12, MLE12, Murine Lung Epithelial-12

Документи

MLE-12

Cell line · Номер товару 305314

€550.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

MLE-12 - це клітинна лінія епітеліальних клітин легень мишей, створена з дистального респіраторного епітелію з використанням трансгенних мишей, що експресують антиген великої пухлини вірусу 40 (SV40) під контролем промотора людського сурфактантного протеїну С (SP-C). Ця клітинна лінія характеризується здатністю підтримувати певні властивості альвеолярних клітин типу II, такі як експресія сурфактантних білків SP-B і SP-C, які мають вирішальне значення для синтезу легеневих сурфактантів і функції легень. Клітини MLE-12 також демонструють ключові морфологічні ознаки альвеолярних клітин типу II, включаючи мікроворсинки і багатоворсисті тіла, хоча їм не вистачає деяких особливостей, таких як пластинчасті тіла в пізніших пасажах.

Клітинна лінія MLE-12 широко використовується для вивчення регуляції білків сурфактанту, секреції та легеневих реакцій на подразники. Вона секретує фосфоліпіди у відповідь на різні секретогени, такі як АТФ і ефіри форболу, імітуючи аспекти функції альвеолярних клітин типу II. Хоча ця секреція є інтенсивною на ранніх стадіях пасажу, вона зменшується на пізніх стадіях пасажу разом зі змінами в рецепторно-опосередкованих відповідях. Ця модель є особливо цінною для вивчення механізмів, що лежать в основі респіраторних дистрес-синдромів та дефіциту сурфактантів. Крім того, ця клітинна лінія дає уявлення про легеневий канцерогенез, враховуючи її походження з пухлинного процесу, спричиненого SV40.

Клітини MLE-12 слугують інструментом для з'ясування шляхів переробки білків сурфактантів та тестування терапевтичних стратегій заміни сурфактантів. Підтримання експресії SP-C, маркера, специфічного для альвеолярного епітелію, робить їх релевантною моделлю in vitro для дослідження специфічних для легень процесів і захворювань.

Тканина
Легені
Хвороба
Нормально
Синоніми
  • MLE 12
  • MLE12
  • Murine Lung Epithelial-12

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This murine lung epithelial cell line (MLE-12) contains an SV40 T-Antigen construct introduced via transfection, supporting immortalization of primary lung epithelial cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епітеліальна клітина
Пухлиноутворювальний
Так, у голих мишей

04Ідентифікатори

Посилання
MLE-12 (номер за каталогом Cytion 305314)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_3751

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
Експресуються гени: легеневі сурфактантні білки B, C (SP-B, SP-C)
Віруси
Трансформант: вірус сибірки 40 (SV40)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
FVB/N-Tg(SFTPC-TAg)5.1 Щелепа трансгенна
Вік донора
5 місяців

10Детальна інформація про товар

Таблиця складу