MLE-12

MLE-12 là dòng tế bào biểu mô phổi chuột được thiết lập từ biểu mô hô hấp xa bằng cách sử dụng chuột biến đổi gen biểu hiện kháng nguyên khối u lớn của virus khỉ 40 (SV40) dưới sự điều khiển của promoter protein surfactant C (SP-C) của người. Dòng tế bào này có đặc điểm duy trì một số tính chất của tế bào loại II phế nang, như biểu hiện các protein surfactant SP-B và SP-C, vốn là yếu tố quan trọng cho quá trình tổng hợp surfactant phổi và chức năng phổi. Tế bào MLE-12 cũng thể hiện các đặc điểm hình thái học chính của tế bào loại II phế nang, bao gồm vi lông và thể đa bào, mặc dù chúng thiếu một số đặc điểm như thể lamellar ở các thế hệ sau.

Dòng tế bào MLE-12 được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu điều hòa, tiết và phản ứng phổi đối với các kích thích của protein surfactant. Nó tiết phospholipid đáp ứng với các chất kích thích tiết như ATP và este phorbol, mô phỏng một số khía cạnh của chức năng tế bào phế nang loại II. Mặc dù quá trình tiết này mạnh mẽ ở các thế hệ đầu, nó giảm dần ở các thế hệ sau, kèm theo sự thay đổi trong các phản ứng trung gian thụ thể. Mô hình này đặc biệt hữu ích để khám phá các cơ chế cơ bản của hội chứng suy hô hấp và thiếu hụt surfactant. Ngoài ra, dòng tế bào này cung cấp thông tin về quá trình ung thư phổi, do nó được tạo ra từ quá trình ung thư hóa do SV40 gây ra.

Tế bào MLE-12 được sử dụng như một công cụ để làm sáng tỏ các con đường xử lý protein surfactant và thử nghiệm các chiến lược điều trị thay thế surfactant. Việc duy trì biểu hiện SP-C, một dấu hiệu đặc hiệu của biểu mô phế nang, khiến chúng trở thành mô hình in vitro phù hợp để nghiên cứu các quá trình và bệnh lý đặc hiệu của phổi.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.