MLE-12

La lignée MLE-12 est une lignée de cellules épithéliales pulmonaires murines établie à partir de l’épithélium respiratoire distal, à partir de souris transgéniques exprimant le grand antigène tumoral du virus simien 40 (SV40) sous le contrôle du promoteur de la protéine C du surfactant humain (SP-C). Cette lignée cellulaire se caractérise par sa capacité à conserver certaines propriétés des cellules alvéolaires de type II, telles que l’expression des protéines de surfactant SP-B et SP-C, qui sont essentielles à la synthèse du surfactant pulmonaire et à la fonction pulmonaire. Les cellules MLE-12 présentent également des caractéristiques morphologiques clés des cellules alvéolaires de type II, notamment des microvillosités et des corps multivésiculaires, bien qu’elles ne possèdent pas certaines caractéristiques, comme les corps lamellaires, lors des passages ultérieurs.

La lignée cellulaire MLE-12 est largement utilisée pour étudier la régulation des protéines du surfactant, leur sécrétion et les réponses pulmonaires aux stimuli. Elle sécrète des phospholipides en réponse à divers sécrétagogues tels que l’ATP et les esters de phorbol, imitant ainsi certains aspects de la fonction des cellules alvéolaires de type II. Alors que cette sécrétion est importante lors des premiers passages, elle diminue au cours des passages ultérieurs, parallèlement à des changements dans les réponses médiées par les récepteurs. Ce modèle est particulièrement utile pour explorer les mécanismes sous-jacents aux syndromes de détresse respiratoire et aux déficits en surfactant. De plus, cette lignée cellulaire offre des aperçus sur la carcinogenèse pulmonaire, étant donné qu’elle provient d’une tumorigenèse induite par le SV40.

Les cellules MLE-12 servent d’outil pour élucider les voies de traitement des protéines du surfactant et pour tester des stratégies thérapeutiques de remplacement du surfactant. Le fait qu’elles conservent l’expression de la SP-C, un marqueur spécifique de l’épithélium alvéolaire, en fait un modèle in vitro pertinent pour l’étude des processus et des maladies spécifiques aux poumons.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.