NCI-H2122

La lignée cellulaire NCI-H2122 est un modèle humain de cancer du poumon non à petites cellules (CPNPC) dérivé d'un patient atteint d'un adénocarcinome. Elle se distingue par la présence d'une mutation KRAS G12C, une caractéristique du CPNPC qui entraîne une activation constitutive de la voie de signalisation MAPK. Cette lignée cellulaire est largement utilisée dans les études portant sur les interventions thérapeutiques ciblant KRAS G12C et les voies en aval associées, en particulier celles impliquant des inhibiteurs de MEK et ERK. La recherche utilisant NCI-H2122 a mis en évidence son rôle dans la compréhension des mécanismes de résistance aux médicaments et dans l'optimisation des thérapies combinées.

Des études précliniques utilisant la lignée cellulaire NCI-H2122 ont démontré son utilité dans l'exploration de la résistance aux inhibiteurs de la voie MAPK. Par exemple, les approches de criblage CRISPR ont identifié MAPK7 (ERK5) comme un médiateur critique de la réactivation de la voie après l'inhibition de MEK, suggérant des stratégies de combinaison potentielles utilisant des inhibiteurs de MEK comme le cobimetinib et des inhibiteurs de MAPK7. La lignée sert également de modèle pour évaluer l'efficacité des inhibiteurs de petites molécules, y compris ceux qui ciblent PI3K et BRAF, qui sont pertinents en combinaison avec les traitements spécifiques de KRAS.

NCI-H2122 est également utilisé pour étudier les vulnérabilités métaboliques dans le CBNPC. Des études ont montré que la biosynthèse des sérines et le cycle des folates sont des voies métaboliques qui contribuent à la résistance aux thérapies ciblées, telles que les inhibiteurs de BRAF. Des modulateurs métaboliques comme le méthotrexate et des stratégies de privation de sérine ont été testés sur cette lignée cellulaire, ce qui a permis de comprendre comment surmonter la résistance aux médicaments et d'identifier de nouvelles cibles métaboliques pour l'exploitation thérapeutique.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie