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NCI-H2122
Tissue
肺
Disease
腺癌
Metastatic site
胸腔積液
Synonyms
H2122, H-2122, NCIH2122

Documents

NCI-H2122

Cell line · Product number 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

US$395.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

NCI-H2122 細胞系是一種源自腺癌患者的人類非小細胞肺癌(NSCLC)模型。其顯著特徵在於攜帶 KRAS G12C 突變,此為非小細胞肺癌的標誌性特徵,會導致 MAPK 訊號傳導路徑的持續活化。 該細胞系廣泛應用於針對 KRAS G12C 及其相關下游路徑(特別是涉及 MEK 和 ERK 抑制劑的研究)的治療干預研究。利用 NCI-H2122 進行的研究,已凸顯其在闡明藥物抗藥性機制及優化聯合療法方面的作用。

採用 NCI-H2122 細胞系的臨床前研究已證實,該細胞系在探索對 MAPK 路徑抑制劑的耐藥性方面具有實用價值。 例如,CRISPR 篩選方法已鑑定出 MAPK7(ERK5)是 MEK 抑制後該通路重新活化的關鍵介質,這暗示了可採用科比美替尼(cobimetinib)等 MEK 抑制劑與 MAPK7 抑制劑進行聯合治療的潛在策略。 該細胞系亦可用作評估小分子抑制劑(包括針對 PI3K 和 BRAF 的抑制劑)療效的模型,這些抑制劑與 KRAS 特異性治療的聯合應用具有重要意義。

NCI-H2122 亦被用於探究非小細胞肺癌(NSCLC)的代謝脆弱性。研究指出,絲氨酸生物合成與葉酸循環是導致對標靶療法(如 BRAF 抑制劑)產生抗藥性的代謝途徑。 研究人員已在此細胞系上測試了甲氨蝶呤等代謝調節劑以及絲氨酸剝奪策略,這些研究為克服藥物抗藥性提供了新見解,並協助識別可供治療利用的新代謝靶點。

Tissue
肺
Disease
腺癌
Metastatic site
胸腔積液
Synonyms
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣、淋巴母細胞樣

04Identifiers

Citation
NCI-H2122(Cytion 型號 305600)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Expression and susceptibility

Mutational profile
突變:KRAS,p.Gly12Cys (c.34G>T),純合子;突變:TP53,p.Gln16Leu (c.47A>T),雜合子; 突變:TP53,p.Cys176Phe (c.527G>T),雜合子

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶需使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則需使用5-10毫升。 接著,用 TrypLE Express 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫落。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
46年
Ethnicity
高加索人