İçeriğe atla
NCI-H2122
Doku
Akciğer
Hastalık
Adenokarsinom
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
H2122, H-2122, NCIH2122

NCI-H2122

Cell line · Ürün numarası 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-H2122 hücre hattı, bir adenokarsinom hastasından türetilen bir insan küçük hücreli dışı akciğer kanseri (NSCLC) modelidir. MAPK sinyal yolunun yapısal aktivasyonuna yol açan ve NSCLC'nin ayırt edici özelliklerinden biri olan KRAS G12C mutasyonunu barındırmasıyla dikkat çekmektedir. Bu hücre hattı, KRAS G12C'yi ve ilişkili aşağı akış yollarını, özellikle de MEK ve ERK inhibitörlerini içerenleri hedefleyen terapötik müdahalelere odaklanan çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. NCI-H2122 kullanılarak yapılan araştırmalar, ilaç direnci mekanizmalarının anlaşılmasında ve kombinasyon tedavilerinin optimize edilmesindeki rolünü vurgulamıştır.

NCI-H2122 hücre hattını kullanan klinik öncesi çalışmalar, MAPK yolağı inhibitörlerine karşı direncin araştırılmasındaki faydasını göstermiştir. Örneğin, CRISPR tarama yaklaşımları, MEK inhibisyonunu takiben MAPK7'yi (ERK5) yolak reaktivasyonunun kritik bir aracısı olarak tanımlamış ve kobimetinib ve MAPK7 inhibitörleri gibi MEK inhibitörlerini kullanan potansiyel kombinasyon stratejileri önermiştir. Bu hat ayrıca, KRAS'a özgü tedavilerle kombinasyon halinde kullanılabilecek PI3K ve BRAF'ı hedefleyenler de dahil olmak üzere küçük moleküllü inhibitörlerin etkinliğini değerlendirmek için bir model görevi görmektedir.

NCI-H2122 ayrıca NSCLC'deki metabolik zayıflıkların araştırılmasında da kullanılmaktadır. Çalışmalar, serin biyosentezini ve folat döngüsünü BRAF inhibitörleri gibi hedefe yönelik tedavilere karşı dirence katkıda bulunan metabolik yollar olarak göstermiştir. Metotreksat gibi metabolik modülatörler ve serin yoksunluğu stratejileri bu hücre hattı üzerinde test edilmiş, ilaç direncinin üstesinden gelme ve terapötik kullanım için yeni metabolik hedefler belirleme konusunda içgörüler sağlamıştır.

Doku
Akciğer
Hastalık
Adenokarsinom
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri, Lenfoblast benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H2122 (Cytion katalog numarası 305600)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigot; Mutasyon: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), heterozigot; Mutasyon: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), heterozigot

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri TrypLE Express ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
46 yıl
Etnik köken
Kafkas