Prejsť na obsah
NCI-H2122
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Adenokarcinóm
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
H2122, H-2122, NCIH2122

Dokumenty

NCI-H2122

Cell line · Číslo výrobku 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia NCI-H2122 je model ľudského nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC) odvodený od pacienta s adenokarcinómom. Je pozoruhodná tým, že obsahuje mutáciu KRAS G12C, ktorá je charakteristickým znakom NSCLC a vedie ku konštitutívnej aktivácii signálnej dráhy MAPK. Táto bunková línia sa vo veľkej miere používa v štúdiách zameraných na terapeutické zásahy zamerané na KRAS G12C a súvisiace nadväzujúce dráhy, najmä tie, ktoré zahŕňajú inhibítory MEK a ERK. Výskum využívajúci NCI-H2122 zdôraznil jej úlohu pri pochopení mechanizmov rezistencie na lieky a pri optimalizácii kombinovaných terapií.

Predklinické štúdie využívajúce bunkovú líniu NCI-H2122 preukázali jej užitočnosť pri skúmaní rezistencie na inhibítory dráhy MAPK. Napríklad skríningové prístupy CRISPR identifikovali MAPK7 (ERK5) ako kritický mediátor reaktivácie dráhy po inhibícii MEK, čo naznačuje potenciálne kombinované stratégie využívajúce inhibítory MEK, ako je kobimetinib, a inhibítory MAPK7. Táto línia slúži aj ako model na hodnotenie účinnosti inhibítorov malých molekúl vrátane inhibítorov zameraných na PI3K a BRAF, ktoré sú relevantné v kombinácii s liečbou špecifickou pre KRAS.

NCI-H2122 sa využíva aj pri skúmaní metabolických zraniteľností v NSCLC. Štúdie poukázali na biosyntézu serínu a folátový cyklus ako metabolické dráhy, ktoré prispievajú k rezistencii voči cieleným terapiám, ako sú inhibítory BRAF. Na tejto bunkovej línii sa testovali metabolické modulátory, ako napríklad metotrexát a stratégie deprivácie serínu, čo poskytlo poznatky o prekonávaní rezistencie na lieky a identifikácii nových metabolických cieľov na terapeutické využitie.

Tkanivo
Pľúca
Choroba
Adenokarcinóm
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové, lymfoblastové

04Identifikátory

Citácia
NCI-H2122 (katalógové číslo Cytion 305600)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: Gly12Cys (c.34G>T), homozygotná; Mutácia: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygotná: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), heterozygotná; mutácia: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), heterozygotná

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne zakryte prípravkom TrypLE Express, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
46 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský